闫雪萍 吴杉杉 王利婷 史璐

牙髓神经是存在于牙髓组织内的神经感受器，主要发挥感觉功能，并参与调控牙髓微环境和牙本质再生，通过提高牙髓神经的再生功能，对于损伤牙齿正常功能的修复、减少牙髓治疗相关并发症有重要意义[1-2]。神经细胞本身缺乏再生能力，损伤后难以自我修复，因此如何促进神经细胞修复成为研究热点。人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells，hDPSCs)是由神经嵴发育而来、位于牙髓组织中的成体干细胞，具有与骨髓间充质干细胞相似免疫表型，可自我更新和多向分化，有较强的克隆能力，且有易获得、培养条件简单的优点，为牙髓神经细胞的再生修复提供了新的研究途径[3]。尼尔样-1型分子(nel-like molecule-1，Nell-1)是一种具有高度保守性的分泌型蛋白，对于成骨细胞分化、新生骨形成等方面有正向调节作用[4]。研究[5]证实，Nell-1能与其位于成骨谱系细胞表面的受体Integrinβ1结合，启动丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信号级联，影响细胞的粘附、增殖与分化。目前关于Nell-1促进成骨向分化的相关研究较多，在神经向分化方面的相关研究较少。本研究通过体外分离hDPSCs，研究Nell-1蛋白基于MAPK信号通路对hDPSCs神经向诱导分化的调控作用及机制，为牙髓疾病的治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞取材 取材于口腔颌面外科门诊18～25 岁志愿者，因正畸或阻生齿新鲜拔除健康完整恒牙，从中分离hDPSCs。研究实施前向志愿者讲述牙齿用途，均知情同意,并获得医院伦理委员会批准。

1.1.2 药物、主要试剂和仪器 人重组Nell-1蛋白[(R&D systems，lic.Minneapolis，MN55413，USA)；……