miR-944过表达对三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231的侵袭迁移和上皮间质转化抑制作用及其机制
2021-10-15朱克鹏肖勋蓉罗义尹均明弋文何英宋远鹏杜果城
朱克鹏,肖勋蓉,罗义,尹均明,弋文,何英,宋远鹏,杜果城
1川北医学院附属南充市中心医院乳腺外科,四川南充637000;
2川北医学院附属南充市中心医院康复科
三阴乳腺癌(TNBC)是乳腺癌常见的亚型,其雌、孕激素受体和人表皮生长因子受体表达均为阴性,占所有乳腺癌的15%~20%,并且具有恶性程度高,易侵袭、转移的特点,预后较差[1]。尽管随着外科手术、放化疗技术的发展,乳腺癌的治疗效果明显提高,但乳腺癌术后复发转移仍是患者死亡的主要原因[2]。相比于非TNBC,TNBC具有更高的复发及转移率[3]。
微小RNA(miRNA)是一类近年发现的具有转录后调节功能的小分子单链RNA,在肿瘤的发生发展中发挥着重要调控作用[4]。miR-944是近期新发现的一个肿瘤相关的miRNA分子,其参与调控多种肿瘤细胞的增殖、凋亡和转移[5-7]。目前miR-944在TNBC中的作用及机制尚不明确。2020年8月—2021年2月,我们观察了miR-944在TNBC细胞系中的表达变化,探讨了其对TNBC细胞侵袭、迁移能力和上皮间质转化(EMT)的影响,并进一步探讨了其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料人TNBC细胞系MDA-MB-231、MDAMB-453、HCC1806及正常乳腺上皮细胞系HBL-100均购自美国ATCC公司,培养于含10%胎牛血清和1%青霉素—链霉素溶液的细胞培养基,置于37℃、95%饱和湿度及5%CO2的恒温环境中培养,细胞融合度达70%时,应用0.25%胰酶消化传代。TRIzol试剂购自北京达科为生物公司;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司;逆转录试剂盒、qRT-PCR试剂盒均购自大连宝生物公司;miR-944模拟物(miR-944 mimics)、阴性对照物(NC-mimics)及引物均购自上海吉玛制药公司;Transwell小室购自美国Corning公司;Mgtrigel基质胶购自美国BD公司;Ecadherin、Vimentin、Fibronectin、GATA6及GAPDH抗体均购自美国CST公司。……
