赵艳利，康志强，毛 雨，张晓珂，孙 玲，汪 湲

(郑州大学附属郑州中心医院内分泌科，河南 郑州 450000)

甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)是最常见的甲状腺恶性肿瘤，研究表明，10%～15%的PTC患者是中度分化的PTC变异型，这种变异型可促进癌细胞的侵略性，导致患者具有较高病死率[1-2]。微RNA(microRNA，miRNA)是非编码的小分子RNA，与特定靶基因3′非翻译区结合后共同调节基因的转录和翻译，与肿瘤发生、发展密切相关[3-4]。研究表明，miR-152在PTC中表达下调，在PTC发生、发展中发挥重要作用[5]，但miR-152在PTC中的具体作用机制尚不清楚。本研究通过体外培养PTC细胞株TPC-1，观察miR-152异常表达对TPC-1细胞生物学功能的影响，并预测miR-152可能作用的靶基因，为寻找PTC新的治疗靶点提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂与仪器人PTC细胞株TPC-1、正常甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1由上海中国科学院细胞研究所提供；达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco′s modified Eagle′s medium，DMEM)购自美国Gibco公司，兔多克隆内质网脂质Raft关联蛋白1(endoplasmic reticulum lipid raft associated protein 1，ERLIN1)抗体购自英国Abcam公司，miR-152 mimics、miRNA-mimics阴性对照购自北京博迈斯科技发展有限公司，实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative reverse transcription polymerasechain reaction，qRT-PCR)所需引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成；Mir-162-PC/Mir-262-PC型CO2培养箱购自日本松下公司，SpectraMax®iD5酶标仪购自美国Molecular Devices公司，BD FACSCanto Ⅱ流式细胞仪购自美国BD公司，XDS-10显微镜购自上海炳宇光学仪器有限公司，ChemiDocXRS化学发光成像系统购自美国Bio-Rad公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养将TPC-1、Nthy-ori 3-1细胞接种于DMEM培养基，置于37 ℃、含体积分数5% CO2的恒温培养箱中培养12 h后，显微镜下观察细胞生长状态，细胞融合达80%左右时进行消化、传代，取对数生长期细胞进行后续实验。……