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银杏内酯B口服对cuprizone诱导的脱髓鞘小鼠的髓鞘保护

2021-10-11俞明杨赵梦茹田童张倩霞张雨萌杨颖博肖保国肖伟

关键词:小鼠模型

俞明杨 赵梦茹 田童 张倩霞 张雨萌 杨颖博 肖保国 肖伟

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种中枢神经系统脱髓鞘疾病,以神经炎症、脱髓鞘和轴突丢失为主要病理学特点[1]。双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,可靶向诱导少突胶质细胞死亡而引发中枢髓鞘脱失,常用于髓鞘脱失及保护再生的研究[2],用其诱导的脱髓鞘动物模型可模拟MS的病理变化。银杏内酯B(ginkgolide B,GB)是一种银杏二萜内酯单体,是银杏叶提取物的主要有效成分,具有抗炎、抗氧化、抗血管生成和防治阿尔兹海默等作用[3]。作者团队前期研究发现腹腔注射GB可保护CPZ诱导的脱髓鞘小鼠的髓鞘脱失和行为异常[4]。然而,脱髓鞘疾病作为神经系统慢性病,需要长期治疗,静脉注射用药并不合适。近年来,口服给药已成为脱髓鞘疾病新药的研发趋势。本研究探索了口服GB对CPZ诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的保护作用,旨在为MS的治疗提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 动物和BV-2细胞选取8周龄雄性C57BL/6小鼠24只,体重18~22 g,购自上海西普尔必凯实验动物有限公司,饲养于室温23~25℃、湿度(50±5)%、光/暗循环12 h的SPF级动物房,自由饮水与进食。适应性饲养1周后,将小鼠随机分为正常组、CPZ模型组、GB干预组,每组8只。动物实验操作得到江苏康缘药业股份有限公司伦理委员会批准通过。BV-2细胞购自武汉大学,使用含10%(体积分数)胎牛血清和1%(体积分数)双抗的RPMI 1640培养液,置37℃,5%(体积分数)CO2培养箱中培养,待细胞长至70%~80%时进行实验。

1.2 主要试剂和仪器CPZ、固蓝(LFB)和脂多糖(LPS)购于美国 Sigma 公……

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