紫朱软膏对下肢静脉性溃疡成纤维细胞的影响及其机制研究*
2021-10-09杨晓黄仁燕李文惠樊炜静徐烽闫少庆柳国斌
杨晓,黄仁燕,李文惠,樊炜静,徐烽,闫少庆,柳国斌
(上海中医药大学附属曙光医院中医血管外科,上海 201203)
下肢静脉性溃疡(venous leg ulcer,VLUs)是下肢小腿溃疡中最常见的一种疾病,是继发于下肢慢性静脉功能不全晚期最严重和难治的并发症,常经久不愈[1],其发病率高,愈合慢且易复发[2],随着年龄的增加发病率和患病率逐渐升高[3]。VLUs的愈合是一个非常复杂的过程,需要大量炎症细胞的浸润、血管再生形成肉芽组织、成纤维细胞迁移、纤维母细胞转化成肌成纤维细胞、胶原沉积 、表皮再生。转化生长因子-β1(TGF-β1)是组织损伤修复与纤维化过程中关键的诱导因子。有效的细胞因子对于疮面愈合至关重要[4]。紫朱软膏是奚九一教授以“补虚祛瘀生肌法”为原则研制的外用药物,具有清热解毒、祛腐生肌、补气益血之功效。紫朱软膏组成药物与TGF-β1/Smad3信号通路关系已有相关的研究[5],笔者在本研究主要研究紫朱软膏与TGF-β1/Smads信号通路的关系,通过检测 TGF-β/Smads 信号通路中的关键蛋白,初步探讨此通路在VLUs愈合过程中的作用及可能机制。
1 材料与方法
1.1实验动物 成年新西兰雄性大白兔,体质量2.0~2.5 kg,上海中医药大学动物实验中心提供,实验动物生产许可证号:SCXK(沪)2009-0069。饲养环境: 室温为(23±2)℃,相对湿度为(56±10)%。以标准颗粒饲料饲养,动物自由摄食及饮水。
1.2试药 外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(商品名:贝复济,rb-bFGF,珠海亿胜生物制药公司,批准文号:国药准字 S10980077);α-SMA抗体(美国Sigma公司,货号:A2547),PCNA抗体(美国Novus Biologicals公司,货号:NB500-106),TGF-β1抗体(美国R&D Systems公司,货号:MAB240-100),p-Smad2、p-Smad3(广州智造软件科技有限公司,货号:9520s),Smad7(美国Sigma公司,货号:AV32008)。……
