不同冰冻条件对肌性组织标本冻存效果的影响
2021-09-30孙红星窦永青
河北医科大学学报 2021年9期
孙红星,窦永青,韩 梅*
(1.河北医科大学研究生学院,河北 石家庄 050017;2.河北医科大学生物化学与分子生物学教研室,河北 石家庄 050017)
组织切片作为医学研究中最常用的实验方法,保存良好的组织形态是后续实验重要的前提,最常见的是石蜡切片和冰冻切片两种类型。石蜡切片虽然可以使组织表现出良好形态[1],但脱水、透明等中间环节中的有机试剂会使组织样品中的蛋白质发生不同程度的变性,而冰冻切片可以更好的保持组织细胞抗原的活性而被广泛应用[2]。冰冻切片主要应用于一些组织化学方法和免疫组织化学方法、临床手术的快速病理诊断等。冰冻切片的质量受多种因素的影响,如取材手法、冰冻方法、切片方法等,其中冻存方法[3]或冰冻速度[4]对组织有明显的影响。然而,对于不同肌性组织(如骨骼肌、心肌和平滑肌)标本最适宜的冰冻条件尚无比较性研究证据。常用的组织标本冰冻有三种方式:①将组织直接投放到液氮中(简称液氮浸入法),使其快速冷冻;②将组织放入锡纸托中,漂浮于液氮上(简称液氮漂浮法),使其以慢于液氮浸入法的速度冷冻;③将组织直接置于-80 ℃冰箱(简称直接-80 ℃法),使其以更慢的速度冷冻。本研究通过切片苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色对比这三种方法处理的骨骼肌、平滑肌和心肌组织形态差异,以期能够得出不同肌性组织冰冻方法的最优条件。
1 材料与方法
1.1实验动物 本实验所用动物为鼠龄8~12周的C57BL/6野生小鼠。饲养于温度湿度恒定的独立通气笼盒系统中,标准鼠粮饲养,饮水为纯净水,自由进食水。……
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