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基于固相凝集法的IgG抗-A/B检测方法的建立和评价

2021-09-26施晶晶东南大学附属中大医院输血科南京210009

中国免疫学杂志 2021年17期
关键词:血清检测方法

张 强 施晶晶 张 敏 (东南大学附属中大医院输血科,南京210009)

ABO 新生儿溶血病(ABO hemolytic disease of the newborn,ABO-HDN)是最常见的由于母胎血型不合引发的胎儿或新生儿同种免疫性溶血性疾病,一般见于含有IgG 抗-A/B 的O 型血孕妇所产的非O型血新生儿[1-2]。IgG 类抗体可穿过胎盘屏障,与含有A 或B 抗原的胎儿红细胞特异性结合,通过补体介导的细胞溶解作用导致红细胞溶解破坏,引发胎儿或新生儿贫血、高胆红素血症等,严重者需要换血[3]。研究证实,孕妇体内 IgG 抗-A/B 效价是 ABO-HDN 发生的重要因素,临床上用于检测孕妇IgG 抗-A/B 抗体效价的方法主要为试管法和微柱凝胶法[4-5]。由于血清中同时存在 IgM 和 IgG 2 类血型抗体,2 种方法均需先采用巯基乙醇(2-Mercaptoetha⁃nol,2-ME)灭活 IgM 类抗体,再检测 IgG 抗体,检测时间长,操作复杂,且2-ME 毒性较大,严重损伤环境和人体。因此,本研究拟建立一种以固相凝集法为基础的IgG 抗-A/B 效价检测方法,满足检验要求的同时显著提高检测效率,避免试剂对环境和工作人员的伤害。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 临床资料 选取2019 年1 月至7 月我院门诊和住院待产的 O 型血孕妇 40 例,年龄 23~45 岁,2019 年江苏省血液中心健康献血人员63 例(A、B、AB型各20例,O型3例),微柱凝胶法检测IgG-抗A/B效价为1∶64、1∶512、1∶1 024的标本各1例。

1.2 仪器与试剂 微柱凝胶检测系统(37℃恒温孵育器、微柱凝胶卡及其配套试剂,伯乐);96 孔U形板(上海晶安);医用离心机(北京白洋有限公司);低离子溶液(伯乐);巯基乙醇(长春博讯);抗人球蛋白(抗IgG)检测试剂盒(上海血液生物有限公司);Rh-D(IgG)血液定型试剂(单克隆抗体,北京金豪);磷酸盐缓冲液(pH=7.2)、1%O型指示红细胞悬液为课题组自制。……

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