FGD5-AS1 调控miR-133a-3p 对脓毒症血管内皮细胞的细胞活性、凋亡及炎症因子表达的影响
2021-09-26刘德智新乡市中心医院新乡医学院第四临床学院重症医学科二区新乡453000
杨 燕 刘德智 (新乡市中心医院,新乡医学院第四临床学院重症医学科二区,新乡453000)
脓毒症是一种由感染引起的全身炎症反应综合征,而血管内皮细胞在脓毒症发生过程中发挥重要作用[1-2]。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可促进血管内皮细胞炎症反应从而诱导细胞凋亡最终造成细胞损伤[3-4]。目前关于脓毒症血管内皮细胞损伤发生的分子机制尚未完全阐明,因而深入探究脓毒症血管内皮细胞损伤机制有助于提高诊断及治疗效果。长链非编码RNA FGD5-AS1(long non-coding RNA FGD5-AS1,LncRNA FGD5-AS1)在牙周炎中呈低表达,并可影响牙周炎发生及发展过程[5]。生物信息学分析显示微小RNA-133a-3p(microRNA-133a-3p,miR-133a-3p)可能是 FGD5-AS1 的靶基因,研究表明miR-133a-3p 在脓毒症患者血清中表达上调,并可能作为诊断脓毒症的分子标志物[6]。但FGD5-AS1 是否可通过调控miR-133a-3p 的表达从而影响脓毒症发生及发展过程尚未可知。本研究通过LPS 诱导血管内皮细胞构建脓毒症模型,观察FGD5-AS1 与miR-133a-3p 在细胞模型中的表达变化,分析其对细胞增殖、凋亡及炎症因子表达水平的影响,为揭示脓毒症血管内皮细胞损伤的分子机制提供新方向。
1 材料与方法
1.1 材料 20只清洁级SD大鼠体重200~220 g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,动物许可证号:SCXK(湘):2016-0013;LPS 购自美国 Sigma 公司(货号:I2880,生产批号:20170320);膜联蛋白V(An⁃nexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(propid⁃ium iodide,PI)细胞凋亡试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司(货号:MK1025,生产批号:2017-0410);TNF-α、IL-1、IL-6 ELISA 检测试剂盒购自欣博盛生物科技有限公司;杜氏改良培养基(DMEM)、胰蛋白酶、胎牛血清购自美国Thermo Fisher 公司;Lipofectamine 2000 购自美国 Invitrogen 公司(货号:11668,生产批号:20170316);pcDNA3.1购自上海远慕生物科技有限公司;……
