沉默LncRNA TUG1通过上调miR-214-5p表达增加乳腺癌细胞的放射敏感性
2021-09-25孙露阳葛锁华彭俊华江苏大学附属金坛医院检验科常州213200
孙露阳 葛锁华 彭俊华 周 红(江苏大学附属金坛医院检验科,常州213200)
乳腺癌是威胁女性生命安全的恶性肿瘤之一,随着现代社会节奏的加快,乳腺癌发病率逐年上升,已严重影响患者生活质量[1]。目前乳腺癌的治疗方式为手术并辅以放疗或化疗,但术后患者预后差且极易发生转移[2]。研究表明,长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(long noncoding ribonucleic acid taurine up-regulated gene 1,LncRNA TUG1)可促进人乳腺癌细胞增殖和转移[3]。LncRNA TUG1和微小RNA-145(microRNA-145,miR-145)间的双负反馈环促进人膀胱癌细胞的上皮间充质转换和放射抵抗性[4]。下调LncRNA TUG1的表达可通过抑制HMGB1表达来增强膀胱癌的放射敏感性[5]。然而,TUG1对乳腺癌细胞放射敏感性的影响仍然未知。miR-214可通过靶向抑制ATG12及其介导的自噬作用增加结直肠癌的放射敏感性[6]。miR-214通过抑制自噬作用提高乳腺癌细胞对他莫昔芬和富维斯特的敏感性[7]。然而,miR-214对乳腺癌放射敏感性的影响仍未完全阐明。starBase预测发现,TUG1与miR-214-5p具有互补结合的核苷酸位点,提示TUG1可通过充当miR-214-5p的海绵分子调控乳腺癌细胞的放射敏感性。因此,本研究通过检测TUG1的表达及其对乳腺癌细胞的放射敏感性及细胞凋亡的调控作用,探究TUG1与miR-214-5p的靶向作用关系及其可能的作用机制,为乳腺癌诊疗及提高治疗效果提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料 人乳腺上皮细胞MCF-10A与乳腺癌MCF-7细胞均自美国ATCC细胞库。RPMI1640培养基、胰蛋白酶、胎牛血清购自美国Gibco公司;Li‐pofectamine2000转染试剂购自美国Thermo Fisher公司;TUG1干扰质粒、miR-214-5p mimics、miR-214-5p抑制剂(anti-miR-214-5p)及其各自相应的阴性对照购自上海吉玛生物科技有限公司;细胞凋亡检测试剂盒购自美国Sigma公司;……
