贾芳芳 张 阔 葛彩霞 魏力杰 索金玉 王兆芹

（1. 北京望尔生物技术有限公司， 北京 102206； 2.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心， 北京102206； 3.北京市延庆区动物疫病预防控制中心， 北京 102100； 4. 滦州市农业农村局， 河北滦州 063799）

杂色曲霉素 （sterigmatocystin） 是一种真菌毒素， 可由10 余种真菌代谢产生， 能够诱发实验动物产生多种癌瘤[1～2]。 研究表明， 杂色曲霉素与人的胃癌有关， 还可转化成更强烈的致癌物黄曲霉毒素。 杂色曲霉素可污染小麦、 玉米等谷物[3～5]。

由于杂色曲霉素对人畜的危害大， 分布广， 因此需要一种有效而快速的手段检测谷物中杂色曲霉素。 目前有传统的仪器检测方法， 如液相色谱－串联质谱法[6]、 分散固相萃取－超高效液相色谱－三重四极杆质谱法[7～8]、 超高效液相色谱－串联质谱法[9]、 高效液相色谱法[10～13]， 上述仪器方法成本高，用时较长， 而免疫化学检测法具有低成本、 用时较短、 特异性较强等优点[14～15]。 本文研究制备一种杂色曲霉素单克隆抗体， 将其用于胶体金免疫层析试纸条研制， 以期使检测时限及费用满足基层实验室的检测需求。

一、 材料与方法

（一） 材料与仪器杂色曲霉素等标准品 （纯度≥95%） 购自北京标准物质研究中心。 氯金酸（HAuCl4·3H2O）、 牛血清白蛋白 （BSA）、 卵清蛋白 （OVA） 均购自美国 Sigma 公司。 胶体金分析仪由北京勤邦生物技术有限公司提供。 涡旋仪购自湖南湘立科学仪器有限公司[14～15]。

（二） 方法

1. 杂色曲霉素半抗原的制备。 取16 mg 杂色曲霉素， 加入甲醇20 mL 溶解， 加入3－马来酰亚胺丙酸肼 18 mg， 充分搅拌。 加入醋酸钠 1.7 g， 搅拌溶解， 加热， 回流反应 12 h， 停止反应， 旋蒸，除去甲醇。……