角蛋白支架联合TGF-β3基因过表达载体质粒转染的骨髓间充质干细胞对软骨缺损的修复效果
2021-09-22孙永杰庞伟苹叶发刚
精准医学杂志 2021年4期
关键词:支架
孙永杰 庞伟苹 叶发刚
(1 青岛大学医学部临床医学系,山东 青岛 266003; 2 青岛大学附属医院创伤外科;3 单县中心医院骨三科; 4 青岛大学附属医院崂山院区心内科)
软骨缺损是骨科常见的疾病之一,如果不及时治疗,会导致骨性关节炎(OA)发生和进展,严重影响患者的运动功能和降低生活质量[1-3]。骨髓间充质干细胞(BMSC)是干细胞组织工程中常见的种子细胞,具有来源广泛、无排异反应的特点[4-5]。既往也有应用BMSC移植促进软骨缺损修复的研究,但是因为干细胞具有多分化潜能,转化为软骨细胞的效率较低[6-7]。而转化生长因子-β3(TGF-β3)可以特异性诱导BMSC向软骨细胞分化[8-9]。角蛋白支架系统是组织工程领域较为先进的支架结构,具有组织兼容性好、硬度适合、易分解的特点[10-11]。本研究利用新西兰大白兔构建胫骨侧软骨缺损动物模型,将TGF-β3基因的过表达载体质粒转染BMSC并联合角蛋白支架对软骨缺损部位进行填充,利用苏木精-伊红(HE)染色、番红-固绿染色和免疫组织化学染色等方法检测软骨缺损的修复情况,以期为临床上软骨缺损的治疗提供新的思路和方法。
1 材料与方法
1.1 动物来源
新西兰种大白兔20只购自济南实验动物中心,清洁级实验动物,雄性,年龄为(12.97±1.21)月,合格证书为(SCXK(鲁)2018-1119)。本研究方案通过青岛大学附属医院动物伦理委员会的批准[批准号:CN(鲁)B2020-7845]。
1.2 试剂
DMEM培养基、胰蛋白酶和HE染液均购自北京碧云天科技有限公司,胎牛血清(FBS)购自以色列BI公司,Aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白一抗购自英国Abcam生物技术有限公司。……
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