韩新源,酉鹏华,雍志军,张雪婷,王暄齐,杨俊生,王顺达*

(1陕西省人民医院康复医学科,西安 710068;2陕西省人民医院心内科;*通讯作者,E-mail:Wanda0916@163.com)

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种严重的进行性临床综合征,以肺血管阻力增加、肺动脉压力升高为特征,常导致右心衰竭,最终导致死亡[1]。肺动脉高压发生发展的病理机制包括持续的肺血管收缩、血管重构和原位血栓形成[2,3]。其中血管重构在发病中尤为重要,多由内膜增厚和中膜增生引起,肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖/凋亡失衡在这一过程中起着重要作用[4,5]。因此,探索PASMCs增殖/凋亡失衡的分子机制,对预防或逆转肺血管重构,从而治疗肺动脉高压具有重要意义。有研究表明,5-羟色胺(5-hydroxytrypta,5-HT)参与PAH的发病机制[6]。PAH患者血浆5-HT浓度升高,而诱导血小板5-HT释放或抑制5-HT摄取的药物可能有助于PAH的发生[7,8]。过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)属于核激素受体超家族成员。有证据表明,PPARγ对PAH发病机制所涉及的多种途径有影响,激活PPARγ可以减轻肺血管功能障碍和PAH,而PPARγ的靶向基因缺失与自发性PAH的发生有关[9]。近年来,有研究报道PPARγ也在调节细胞增殖和凋亡中发挥重要作用[10]。但目前尚未有研究评价PPARγ对5-HT诱导的PASMCs增殖和凋亡的影响。故本研究旨在探讨5-HT对PASMCs增殖和凋亡及PPARγ表达的影响,特别是PPARγ在5-HT诱导的细胞增殖和凋亡的调控中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验主要试剂

人PASMCs(美国ATCC公司)、DMEM培养基、标准胎牛血清(美国Gibco BRL);MTT(美国Sigma公司)、5-HT(美国Tocris公司)、PD98059(美国Sigma公司);15d-PGJ2、罗格列酮和GW9662(美国Cayman公司);anti-PPARγ抗体(美国Santa Cruz公司);Annexin Ⅴ-FLUOS凋亡检测试剂盒(美国Roche Diagnostics公司)。……