吴 菁,蒋志勇,李奎生,刘 芳,吕志武,黄明沂,肖 瑶

(1深圳市宝安区福永人民医院消化内科,深圳 518103;2武汉大学中南医院影像科;3南方医科大学附属深圳宝安医院消化内科;*通讯作者,E-mail:drjinjie@126.com)

胃癌是人类消化系统最常见的恶性肿瘤,发病率不断上升[1]。很多胃癌患者在首次确诊时已位于晚期,失去手术治疗机会,5年生存率很低[2]。探求胃癌的发病机制及新的治疗策略是目前胃癌研究领域的热点。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性非编码RNA,在真核细胞中高度保守[3]。miRNA可通过调节关键基因表达,影响细胞的分化、增殖和发育[4]。据报道,胃癌组织中存在多个miRNA异常表达,其在胃癌的发生和发展过程发挥重要作用[5,6]。Zhang等[7]研究发现,miR-4778-3p在复发或转移的宫颈癌患者组织中呈低表达,抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为。miR-4778-3p在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖的影响尚不清楚。本研究旨在检测miR-4778-3p在胃癌组织中的表达,通过体外实验探讨miR-4778-3p对胃癌细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1 组织标本

选取2018年7月至2020年12月间本院胃肠外科行手术切除的38例胃癌组织及癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)。男性25例,女性13例,年龄51.76±8.96岁。病灶直径<5 cm 12例,病灶直径≥5 cm 26例。Ⅰ期4例,Ⅱ期6例,Ⅲ期28例。淋巴结转移21例,无淋巴结转移17例。所有患者术前均未接受放疗或化疗。本研究经本院伦理委员会批准,所有患者均签署知情同意书。

1.2 细胞株与主要试剂

胃癌MGC803细胞购于中国科学院上海生科院细胞资源中心,收集对数生长期细胞用于实验;miR-4778-3p mimic、miR-NC、SMC4-Wt野生型质粒、SMC4-Mut突变型质粒均购于广州锐博生物科技有限公司;Lipofectamine 3000转染试剂购于美国Invitrogen公司;胎牛血清、RPMI-1640培养基购于美国Gibco公司;双荧光素酶报告基因检测试剂盒购于……