曾赛凡，叶郁红，陈余朋

病理学中的活细胞样本是指将肿瘤细胞以较低密度接种于液体或半固体的培养液中形成悬浮培养的细胞系，对于已培养的活细胞需要转移至玻片上进行染色后镜下细胞形态学观察及细胞性质的鉴定。本实验将活细胞悬液转移至液基固定瓶中进行薄层制片，经HE染色和免疫细胞化学染色检测取得良好效果，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料培养子宫内膜癌细胞系ECC-1(培养基PRMI 1640培养液加入10%胎牛血清)，传代培养于培养瓶中悬浮生长，放置离心管中，普通离心机1 500 r/min离心5 min，用无菌的一次性塑料吸管吸取管底沉淀，滴入新柏液基保存瓶中固定静置15 min。

1.2 细胞制片及染色将保存瓶放置新柏液基薄层T2000仪中制片，第一张制片放置95%乙醇中固定10 min,行苏木精淡染评估细胞富集及重叠，若细胞平铺均匀分布就继续制片，若细胞重叠需按倍数稀释固定液，肉眼观察玻片划定区域有灰白色的细胞富集印记，连续制片10张，放置95%乙醇中固定10 min后，从第10张往前推继续淡染苏木精筛查细胞量，选取有细胞量的玻片行HE染色及免疫细胞化学染色。免疫细胞化学指标：鼠单抗CK(AE1/AE3)(1 ∶2 000，福州迈新公司)、p53(工作液，Dako公司)、PAX8(1 ∶1 000，福州迈新公司)，用子宫内膜癌组织切片作阳性对照。采用免疫细胞化学EnVision法染色，0.01 mol/L柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)抗原修复后，直接加入一抗，室温下孵育30 min，二抗10 min，DAB显色3 min，苏木精复染1 min，脱水、透明、封固，显微镜下观察。

2 结果

HE染色镜下观察细胞平铺均匀分布，细胞呈圆形，核质分明，细胞核呈蓝色，核染色质清晰可见，核仁明显，细胞质红色(图1)。……