薄层色谱法的操作要点及影响因素
2020-07-08姜慧莹陈嘉兴吉林职业技术学院延边133400
北方药学 2020年6期
李 杨 姜慧莹 陈嘉兴 杨 爽 黄 帅(吉林职业技术学院延边133400)
薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上,在展开容器内用展开剂展开,使供试品所含成分分离,所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比[1,2]。薄层色谱法的操作分别是供试品溶液的制备、对照品或对照药材溶液的制备、选择吸附剂、点样、展开、显色与检视。
1 实验方法
1.1 供试品溶液的制备:根据选取的目标成分选用适宜的提取方法和提取溶剂,常用的提取方法包括浸泡、振摇、超声等法、加热回流等。提取的目标成分沸点较低,在提取时应注意不可加热提取,应超声或振摇浸泡提取,制备时不应受热,在鉴别牡丹皮时,由于丹皮酚沸点为31℃,高温蒸干后,丹皮酚易挥发,高温挥干和室温挥干的薄层色谱图。如图1所示。
1.2 选择吸附剂:预制薄层板按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。固定相中可加入黏合剂、荧光剂。硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H 、硅胶HF254、G、H 表示含或不含石膏黏合剂。F254为在紫外光254 nm波长下显绿色背景的荧光剂。按固定相粒径大小分为普通薄层板(10~4 μm)和髙效薄层板(5~10 μm)。自制的薄层板。固定相颗粒大小一般要求粒径为10~40 pm。玻板应光滑、平整,洗净后不附水珠。黏合剂通常为羧甲基纤维素钠,配制时应均匀散落在水的表面,自然沉降,固定相与黏合剂通常为1∶3,混合后,沿一个方向研磨排除气泡。稠度以用研棒黏取呈连珠状而不呈线状下滴为好[2]。……
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