朱一春，黄智奇，施靖天，顾长江，倪 侃，薛旦旦，张春辉

（1南通大学医学院，江苏 226001；2南通大学附属医院甲乳外科；3南通市第一人民医院甲乳外科）

乳腺癌(breast cancer,BC)是女性常见的恶性肿瘤,严重威胁女性健康[1]。目前乳腺癌的治疗手段多种多样,近年来人们逐渐将目光投向乳腺癌分子靶向领域[2]。核糖体蛋白L22(RPL22)在人体各种细胞中均有表达[3],有研究表明PRL22通过选择性上调抑癌基因p53表达,抑制癌细胞的集落形成,从而发挥抑癌作用[4]。本文选择2015年—2019年于我科行乳腺癌改良根治术患者62例,研究RPL22在乳腺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 乳腺癌患者62例,均为女性,平均年龄57.3±11.8岁,中位年龄55.0岁,均未进行术前治疗,且无其他基础疾病。手术获取的乳腺癌组织及癌旁组织各62例标本,-80℃下冻存。本研究经医院伦理委员会批准同意,并获得患者知情同意。

1.2 实验方法

1.2.1 免疫荧光法检测RPL22表达：将石蜡切片在60℃下烤片1 h,随后二甲苯脱蜡10 min。依次加入100%、95%、90%、85%、80%、75%、60%、50%、30%乙醇中进行梯度脱水,自来水冲洗1 min,双氧水冲洗1 min。将切片浸入0.01 mol/L枸橼酸钠缓冲液中,微波最大火力98℃～100℃加热至沸腾,冷却5～10 min,反复2次。冷却至室温后PBS洗涤3次,每次5 min。然后加入5%牛血清白蛋白,室温下封闭20 min,洗去多余液体。滴加按1∶100比例稀释的RPL22抗体进行孵育,4℃过夜。第2天PBS洗涤3次,每次5 min,再滴加二抗室温孵育1 h,PBS洗涤3次,每次5 min。然后加入DAPI液染核及适量抗淬灭剂,盖上盖玻片,镜下观察。

1.2.2 组织RNA提取：将组织标本放入1.5 mL离心管中,加入1 mL TRIzol试剂,研磨器研磨,随后按照说明书步骤提取总RNA。……