单文配，陈 实，刘 云，王 晨，李洋阳，张延安1，，凌 勇1，

（南通大学1医学院；2药学院，江苏 226001）

近年来我国肿瘤发病率年均增长3.9%,死亡率年均增长2.5%[1]。正规治疗后早期癌症患者5年生存率70%～95%,而较晚期患者5年生存率仅10%～30%。因此,早期诊断肿瘤意义重大。荧光成像技术能实时、方便地可视化观察目标组织,侵袭性较低,是肿瘤早期诊断的有力工具[2]。目前荧光探针主要包括纳米探针和小分子荧光探针,两者相比,小分子荧光探针具有制备较容易、可控性高、生物相容性好等优势[3-4]。吲哚菁绿(ICG)、合亚甲基蓝(MB)是FDA批准的荧光染料,在临床上实现前哨淋巴结、神经内分泌肿瘤等的可视化[5],但由于ICG、MB处于“always on”状态,导致不必要的背景信号,信噪比不高,难以进一步提高诊断效能。而“on-off”式荧光探针在正常组织中不发光(off态),一旦进入肿瘤组织则会选择性发出荧光(on态),因而信噪比较高[6]。本研究设计、合成ROS/pH双重响应的β-咔啉类小分子荧光探针H8DP,从细胞和动物水平验证其对肿瘤组织选择性成像的效果,报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 肿瘤细胞Hela和正常细胞LO2购自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所,使用1640完全培养基于37℃、5% CO2培养箱中培养。雌性裸鼠(18～20 g)购自南通大学动物实验中心,将Hela细胞接种于裸鼠皮下,每只小鼠1×106个细胞,3～4周后用于动物成像研究。

1.2 化合物H8DP合成 将L-色氨酸(5.1 g,25 mmol)溶于70 mL甲醇,加入3,4,5-三甲氧基苯甲醛(5.3 g,27.5 mmol),90℃回流搅拌4 h,调节pH至5.0,析出黄色固体。将得到的固体溶于70 mL甲醇,-5℃条件下滴加5.45 mL SOCl2。恢复至室温,回流4 h,调节pH为8.0,析出固体。……