徐莹 操轩

心血管疾病(CVD)是慢性肾衰竭(CRF)患者的主要并发症和首位死亡原因[1]。而慢性肾脏病患者并发心血管疾病大多与血管钙化有关，故对CRF伴血管钙化机制的研究在临床上极为重要。其中建立类似人类CRF血管钙化病理变化的理想动物模型是研究的前提。CRF患者的血管钙化是一种类似于骨和软骨形成的转化过程[2]，而血管平滑肌细胞(VSMC)表达成骨细胞表型是该过程的中心环节[3-4]。骨形成蛋白(BMP)-2是骨细胞表型中重要成员之一，其下游骨转录因子同源盒基因2(Msx2)也起到重要作用。既往国外仅有体外实验研究显示Msx2参与动脉钙化病变过程，故本实验采用高磷饮食联合腺嘌呤灌胃的方法制备新的CRF血管钙化大鼠模型，探讨Msx2在CRF血管钙化大鼠体内实验中的作用机制。

材料与方法

1.材料：12周龄成年雄性SD大鼠30只及大鼠饲料均购于第三军医大学大坪医院实验动物中心，大鼠平均体质量(200±20)g。腺嘌呤购于美国Amersco公司，Von Kossa特殊染色试剂盒购于美国Genmed Scientifics公司，核固红复染试剂购于博士德生物工程公司，二氨基联苯二胺(DAB)显色剂及增强型(Polink-1)免疫组化试剂盒(货号PV-6001)购于北京中山金桥公司，兔抗鼠同源盒基因Msx2(Hox8)多克隆抗体(货号bs-6232R)购于北京博奥森公司。

2.方法

(1)分组与造模方法：选择12周龄健康成年雄性SD大鼠，随机分为3组，即正常对照组、腺嘌呤灌胃组、高磷饮食+腺嘌呤灌胃组,每组10只。将腺嘌呤加蒸馏水配成浓度为2.5%混悬液，置于4 ℃冰箱备用。所有大鼠以标准饲料喂养1周后，腺嘌呤灌胃组及高磷饮食+腺嘌呤灌胃组大鼠每日以腺嘌呤250 mg/kg灌胃，正常对照组采用等量蒸馏水灌胃，均持续6周。……