余晓谦 陈怡

摘要：为了建立左氧氟沙星片微生物限度检查方法，采用中和法加薄膜过滤法对左氧氟沙星片微生物限度方法学，

关键词：左氧氟沙星 微生物限度 中和法 薄膜过滤法

【中图分类号】R97  【文献标识码】A  【文章编号】1673-9026（2021）09-355-02

目前，随着左氧氟沙星片在市场上运用越来越广泛，但是未见左氧氟沙星片微生物限度方法的文献报道。根据中国药典 2020年版[2]微生物限度相关规定，进行了左氧氟沙星片微生物限度方法学验证。由于左氧氟沙星片为抗生素的一种，是喹诺酮类抗生素，因此选用硫酸镁中和剂，本品采用2020年版四部《中国药典》微生物限度计数法检查中的中和法+薄膜过滤法。

一、材料

1、仪器与用具：立式压力蒸汽灭菌器（LDZF-30、LDZM-60KCS-Ⅱ）、净化工作台（SW-CJ-1FD）、霉菌培养箱（MJ-250）、生化培养箱（SHP-150）、生化培养箱（SH-250）

2、稀释剂：硫酸镁、氯化钠、硫酸镁

3、培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（批号：181119）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（批号190102：）、沙氏葡萄糖液体培养基（批号20180122：）、胰酪大豆胨液体培养基（批号：20180302）、麦康凯琼脂培养基（批号：181211）、麦康凯液体培养基（批号：1082781）。

4、实验用菌种：铜绿假单胞菌（CMCC（B）10104）、枯草芽孢杆菌（CMCC（B）63501）、金黄色葡萄球菌（CMCC（B）26003）、白色念珠菌（CMCC（F）98001）、黑曲霉菌（CMCC（F）98003）、大肠埃希菌（CMCC（B）44102）。

二、方法

1、菌液制备：

①取经35℃培养18～24小时的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的新鲜胰酪大豆胨液体培养物1ml，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液制成菌数不大于100cfu的菌悬液;做活菌计数备用。

②取经20℃～25℃培养2～3天的白色念珠菌液体培养物1ml，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液制成菌数不大于100cfu的菌悬液，做活菌计数备用。……