刘利 曹培杰 袁玉 王彩霞

AML 是一种在细胞遗传学和分子生物学存在 高度异质性的血液恶性肿瘤。它是成人白血病中最常见的类型，已经成为严重危害成人健康的重大疾病之一［1］。AML 的病理基础是由体细胞突变，细胞遗传学异常，表观遗传学改变和转录改变等一系列因素引起的细胞增殖、分化及凋亡的改变。地西他滨是一种表观遗传学抑制剂，主要是通过磷酸化后直接掺入DNA，抑制DNA 甲基化转移酶，逆转DNA 高甲基化状态，恢复控制细胞分化增殖基因的正常功能从而发挥抗肿瘤作用。研究表明，地西他滨可促进肿瘤细胞衰老、凋亡，有效拮抗肿瘤形成，且治疗相关的骨髓抑制死亡率较低［2］。本研究主要探索地西他滨对AML 细胞增殖和凋亡的影响，为地西他滨在临床上更广泛用于治疗AML 提供更多基础研究依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料 （1）实验细胞系及培养方法白血病细胞株THP⁃1 和U937 由广州赛哲生物科技有限公司实验室馈赠。培养体系为含10%胎牛血清的1640 培养液，置于37℃、5% CO2培养箱中培养。（2）主要试剂与仪器RPMI1640 培养基（美国Gibico公司），胎牛血清（FBS，美国Gibico 公司），地西他滨（荷兰Pharmachemie B.V.公司），细胞增殖检测试剂盒（MTS）（美国Promega 公司），Annexin V⁃FITC∕细胞凋亡检测试剂盒（美国Sigma⁃aldrich公司），流式细胞仪（美国BD 公司），二氧化碳培养箱（美国Thermo fisher 公司），多功能酶标仪（美国Perkin Elmer 公司）。

1.2 实验方法 （1）取对数生长期的THP⁃1 和U937 接种于96 孔板，接种浓度为5×104∕孔，地西他滨作用浓度分别为0、0.25、0.5、1.0、2.0 μmol∕L，每孔终体积为200 μl，复种3 孔；分别观察作用24、48、72 及96 h 后THP⁃1 和U937 细 胞存 活 情况。（2）细胞增殖实验……