秦桂福 吴琪 宋玉 吴高明 李俟琪

骨肉瘤(Osteosarcoma，OS)是一种间叶组织来源的好发于儿童和青少年的骨骼系统恶性肿瘤，保肢手术和新辅助化疗的综合治疗是骨肉瘤患者常用的治疗手段，化疗药物对杀伤肿瘤细胞、预防肿瘤复发具有重要意义[1-2]。临床上常用的骨肉瘤化疗药物如顺铂(Cisplatin)具有肾毒性和严重呕吐的毒副作用及肿瘤耐药性，限制其长期使用，是影响化疗效果的主要因素[3]。因此，寻找高效低毒的抗肿瘤药物，降低传统化疗药物的使用剂量，可为骨肉瘤的治疗提供更好的策略和方向[4]。

萝藦科植物徐长卿的根及根茎或带根全草，性温、味辛，归肝、胃经，有较强的祛风止痛、温经通络和解郁活血的功效，丹皮酚是徐长卿的主要有效成分，研究发现其在体外对多种肿瘤细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用[5]。PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达失调与肿瘤细胞增殖分化、肿瘤血管形成转移、化疗耐药性关系密切[6-7]。本研究通过探讨徐长卿丹皮酚(Paeonol)联合顺铂对骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和凋亡的影响，揭示PI3K/Akt/mTOR通路磷酸化与骨肉瘤细胞增殖、迁移和凋亡的关系，为临床上徐长卿丹皮酚和顺铂的联合用药提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂

徐长卿丹皮酚(上海阿拉丁公司，批号H111081，纯度>99%)；顺铂(美国Sigma公司，批号P4394，纯度>99%)；0.25% Trypsin、胎牛血清(美国Gibco公司，批号分别为15050065和10099-141)；CCK8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(美国MCE公司，批号HY-K0301)；Transwell(美国BD Biosciences公司，批号353097)；多聚甲醛、TEMED、SDS(国药集团化学试剂有限公司，批号分别为80096618、80125336、30166428)；细胞凋亡检测试剂盒(南京Vazyme有限公司，批号A113-03)；DA……