多重real-time PCR技术快速鉴别特种乳中的乳源动物成分
2021-08-31杨艳歌王丹丹李唯熙王洪越刘鸣畅吴亚君
杨艳歌,李 莉,王丹丹,李唯熙,王洪越,刘鸣畅,吴亚君,*
(1.中国检验检疫科学研究院,北京 100176;2.河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北 邯郸 056038)
目前乳产品市场朝着多样化方向快速发展,羊乳、牦牛乳、水牛乳、骆驼乳、马乳、驴乳等特色乳产品越来越受到关注。联合国粮农组织的数据显示,全球生鲜乳生产量排名前5的分别为牛奶(占81%)、水牛奶(占15%)、山羊奶(占2%)、绵羊奶(占1%)以及骆驼奶(占0.5%)[1]。我国乳品资源丰富,加上产业政策的扶持,特色乳产业逐渐成为南方和西部地区经济增长的亮点。同时牦牛乳[2-3]、山羊乳[4]、驴乳[5]和马乳[6]等乳品在营养素含量上更接近人乳,逐渐受到消费者青睐。
由于特色乳的数量和日产量较小,价格偏高[7-8],容易发生掺假掺杂现象,主要是用价格相对较低的牛乳替代或添加到特色乳,这不仅侵犯了消费者的权益,而且容易引起过敏[9]等健康风险。因此各种乳源可追溯性分析方法陆续涌现,有基于免疫的酶联免疫吸附剂测定技术[10-12],基于非免疫的液相色谱[13-14]、电泳[15-17]或质谱技术[18-20]等。而基因检测技术是被公认的物种鉴定金标准技术,并具有可靠、特异、灵敏、快速的特点[21-23]。自发现牛奶中体细胞可以被用作DNA的来源后[24],以聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)为基础的乳源物种识别技术迅速发展,其中实时PCR(real-time PCR)操作简便,无需电泳即可自动化获得检测结果,并进行快速定性定量分析[25-27]。而多重realtime PCR还可以在一次反应中同时检测多种靶点,实现快速高通量的检测[21,25,28]。
本研究建立可……
