李潇 陈娟 何菊 周继国 罗元宇 程方俊

1.贵州省盘州市动物防疫监测服务站 553537

2.贵州省六盘水市农业科学院 553600

3.贵州省六盘水市水城区动物疫病预防控制中心 553600

4.贵州省威宁县农业农村局 553100

5.西南大学 402460

奶牛乳房炎是由物理，化学或微生物等因素刺激侵入奶牛乳腺所引发的一种炎症反应，其发病率比较高，表现为奶牛产奶量下降，发情期延长，繁殖性能降低。而葡萄球菌是引起奶牛乳房炎主要的细菌之一，该菌在食物中被人摄入后，可引起食物中毒。

本研究是对荣昌区不同奶牛场的78 份奶牛中检测有乳房炎的27 份牛奶乳样进行细菌分离，并检测细菌对抗菌药物的敏感性，筛选出针对葡萄球菌的敏感药物，从而为奶牛乳房炎的防治，临床指导及葡萄球菌的耐药性研究，提供理论依据。

1 材料

普通琼脂培养基；兔血；高盐琼脂培养基；LB 营养肉汤；革兰氏染色液；各类抗生素药物药敏纸片；细菌生化管；细菌基因组DNA 提取试剂盒；PCR 扩增反应试剂盒（宝生物工程有限公司）；DNA 胶回收试剂盒；DNA Marke；16S rRNA 基因引物（由武汉金开瑞有限公司合成）。

立式压力蒸汽灭菌锅、电泳仪、梯度PCR仪、冷冻离心机、双人单面净化工作台、接种环、显微镜和移液枪等。

2 方法

随机采取荣昌区几个奶牛场的泌乳奶牛乳样78 份。采集乳样之前先用温水来清洗乳房，并消毒乳头及和周围部分。收集样品时，弃掉前三把奶、后取10mL 左右的乳样挤入灭菌好的试管中，标记好试管，并详细记录。

进行CMT 试验来判断患有隐性乳房炎的情况，按照农业部所制定的《奶牛乳房炎防治技术指南（试行）》进行诊断。……