孟宪栋， 张海锋

大麻素Ⅰ型受体(CB1R)在中枢神经系统广泛分布，主要存在于兴奋性和抑制性突触终末，内源性大麻素(endocannabinoids，EC)在神经元活动加强时，可以在突触后神经元合成、释放，抑制谷氨酸和GABA释放[1]，对神经传导进行调控。近年来，CB1R 介导的信号机制被认为在控制癫痫急性发作上发挥重要作用[2，3]，因此推测CB1R可能与癫痫发生有关，并且在癫痫发生中对CB1R表达进行了探讨。海马内部存在由內嗅区-齿状回-CA3区-CA1区-下托皮质-內嗅区的单向神经传递环路[4]，SE后海马神经传递闭合环路上CB1R表达特征未见报道。因此，我们对大鼠SE后，海马神经传递闭合环路上CB1R进行光密度测定，观察各区域CB1R表达的时空特征，探讨CB1R在癫痫发生中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 3月龄SD大鼠(空军军医大学动物实验中心)，清洁级，不限雌雄，实验获空军军医大学动物伦理委员会批准。

1.1.2 主要试剂 CB1R抗体(Abcam)，GFAP抗体(Sigma)，NeuN抗体(Sigma)。

1.1.3 主要仪器 冰冻切片机(Leica)，正置显微镜(Olympus)。

1.2 方法

1.2.1 氯化锂-匹罗卡品建立慢性癫痫模型 SD大鼠随机分成实验组和对照组，建立氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。给大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg)，18～20 h后，甲溴东莨菪碱 (1 mg/kg) 腹腔注射，30 min后，腹腔注射匹罗卡品(30 mg/kg)，对发作进行分级[5]：Ⅰ级：肢体和面部自动症；Ⅱ级：点头和咀嚼；Ⅲ级：前肢痉挛；Ⅳ级：伴直立的前肢痉挛；Ⅴ级：摔倒。≥Ⅳ级判定为癫痫持续状态(status epilepticus，SE)，发作持续1 h，腹腔注射地西泮(10 mg/kg)终止。依据SE后不同时间点，分为SE1 w、2 w、3 w、4 w，每组4只，各时间点设立对照组，对照大鼠腹腔注射0.9%NaCl溶液，其他操作与实验组相同。

1.2.2 海马组织标本制备 SE后1 w、2 w、3 w、4 w组SD大鼠以及对照组大鼠，进行10%水合氯醛麻醉，灌注固定。……