纪佳妹 郭萍 王学成 吴奕章 杨稳 周秀娟 杨兵

研究发现,一半以上的致心律失常性右室心肌病(arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy,ARVC)病例是由桥粒基因突变导致,因此ARVC被认为是一种“桥粒病”[1]。桥粒是由三个超基因家族成员的五种蛋白,即斑珠蛋白(PG),桥粒斑菲素蛋白2(PKP2),桥粒芯糖蛋白2(DGS2),桥粒斑蛋白(DSP),桥粒胶蛋白(DSC)相互铆合形成桥粒连接,以保证心肌细胞间机械连接,抵抗机械压力和牵张,同时具有信号传导和参与细胞凋亡等作用[2]。2006年有研究首次发现DSG2 基因突变与ARVC 发病相关[3]。近些年关于DSG2的转基因或基因敲除动物模型等研究也进一步证实DSG2基因突变可以导致ARVC的发生[4]。

本中心前期在一个较大的ARVC家系(共5代32个成员)中发现一个新的、高度保守的DSG2基因突变位点F531C[5]。我们课题组前期构建了DSG2F536C点突变敲入小鼠模型,表达出包括心功能下降和心肌纤维化等符合ARVC 病理生理改变的表型[6]。室性心律失常作为ARVC的重要临床表现之一,其形成机制研究相对较少。笔者研究DSG2F536C点突变基因敲入小鼠心外膜标测电压与心肌纤维化之间的关系,探索心外膜电压变化与心肌纤维化的潜在关联,为ARVC室性心律失常的机制提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 构建DSG2F536C小鼠模型 根据课题组前期研究提供的患者DSG2-F531C 突变,通过小鼠染色体定位,由南京大学模式动物研究所采用基因敲入技术,通过同源重组构建引入DSG2-F536C 点突变(人染色体DSG2-F531C 点突变位点对应小鼠染色体的DSG2-F536C 点突变位点)至胚胎干细胞(ES);筛选出阳性ES细胞克隆行囊胚注射,通过毛色筛选嵌合率大于50%的雄性嵌合小鼠。……