李文学，白慧颖，赵宏晶，周润，葛禾敏，陈润梅，崔青曼，袁春营

（天津科技大学海洋与环境学院，天津 300457）

虾青素具有很强的抗氧化能力，对紫外线引起的皮肤病有较好的治疗效果，对糖尿病引起的眼病也有防治作用，在医药、保健、水产养殖、食品、化妆品等行业得到广泛应用[1-2]。目前，市场上有合成虾青素和天然虾青素，天然虾青素已被证实对人体健康有益，广泛用于保健食品和生物医学研究领域，合成虾青素通常用作饲料的添加剂和色素[3-5]。

虾青素广泛存在于细菌、真菌、藻类中[6]。雨生红球藻是公认的虾青素含量最高的生物，高达4%，在胁迫条件下积累虾青素[7-8]。研究发现温度、盐度、光照、氮磷元素等影响雨生红球藻虾青素的积累[9-10]。沈雄等[11]发现钨酸钠可以使硝酸还原酶的活性降低，使生物减少对硝态氮的吸收，从而达到氮胁迫的效果。本文采用响应面法探讨温度、pH值、NaCl浓度、钨酸钠浓度对雨生红球藻虾青素积累的影响，以期为雨生红球藻的进一步开发利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

雨生红球藻：中国科学院水生生物研究所。

改良 MC培养基（modified chalmers agar）：MgSO4·7H2O 100 mg/L、K2HPO420 mg/L、CaCl2·2H2O 54 mg/L、ZnSO4·7H2O 0.008 2 mg/L、MnCl2·4H2O 0.004 1 mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.038 mg/L、CuSO4·5H2O 0.006 mg/L、CoCl2·6H2O 0.005 1 mg/L、H3BO30.061 mg/L、乙二胺四乙酸二钠 0.019 8 mg/L、KNO3200 mg/L、FeCl3·6H2O 0.0244mg/L，pH 7.2。

1.2 仪器与设备

YXQ-LS-50SII立式蒸汽灭菌器、BSG-250光照培养箱：上海博迅医疗生物仪器股份有限公司；MIKRO 200R台式冷冻离心机：德国Hettich公司；PHS-25酸度计：上海仪电科学仪器股份有限公司；LGJ-10冷冻干燥机：北京华兴科技公司。

1.3 试验方法

1.3.1 试验设计

在前期预试验结果的基础上，采用Design Expert 10.0软件，进行四因素三水平的响应面设计，4个因素分别为温度（A）、pH 值（B）、NaCl浓度（C）和钨酸钠浓度（D），以虾青素含量（Y）为响应值，试验因素及水平见表1。……