苏蔓 赵倩 郭霞 王远花 乔芳 王振雷

ABO血型系统是人类认识最早的血型系统，其在临床输血、法医学鉴定、器官移植等领域均有重要的临床意义[1]。人类ABO血型系统的抗原多态性较高，除常见的A、B、AB、O 4种血型之外，进一步细分的ABO血型，称为ABO亚型。ABO亚型在基因上多由一个或几个碱基突变引起，本实验室血型血清学检测ABO正反定型不符标本2例经测序均发现ABO新等位基因，现报道如下。

材料与方法

1 标本 先证者1，男，57岁，因颈椎病入院后血型检测ABO正反定型不符送本实验室确认；先证者2，女，26岁，孕39周因剖宫产手术术前备血血型鉴定ABO正反定型不符送本实验室确认。

2 血清学检查 血型鉴定按文献[2]及说明书进行操作，试剂包括单克隆抗-A（上海血液生物医药有限公司，批号：20150407）、抗-B标准血清（上海血液生物医药有限公司，批号：20150407），抗-H试剂（上海血液生物医药有限公司，批号：20150129），抗-A1试剂（上海血液生物医药有限公司，批号：20151027），反定型Ac、Bc、Oc（上海血液生物医药有限公司，批号：20165311）。

3 基因组DNA提取 采用血液基因组DNA抽提试剂盒（天根生化科技有限公司，批号：O3327）严格按产品说明书提取DNA。

4 基因测序 对样本ABO基因扩增产物直接进行6、7外显子测序，因测序结果无法区分突变所发生的单链，为进一步区分将PCR扩增产物连接载体进行克隆测序，测序服务由天津秀鹏生物技术开发有限公司提供。使用Chromas Version 2.6.5软件阅读测序图谱，并与ABO*A1.01序列比较确定突变位点。

结 果

1 ABO正反定型结果 2个标本的血型血清学检测结果如表1所示，均表现为正反定型不符。……