多发性骨髓瘤循环肿瘤浆细胞的免疫表型特征及其临床意义*
2021-08-24蔡梦洁梅仁戴兰沈文红傅琤琤朱明清
蔡梦洁 梅仁 戴兰 沈文红 傅琤琤 朱明清
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一类克隆性浆细胞异常增殖的恶性血液疾病,发病率位于血液系统的第二位,其临床表现差异较大,预后具有显著异质性。近年来,越来越多的研究者对MM患者外周血中循环肿瘤浆细胞(circle tumor plasma cell,CTPC)、肿瘤细胞DNA和RNA以及标志蛋白的监测开展了广泛研究[1,2]。与骨髓检测相比,CTPC具有以下三个优势:①CTPC的检测侵袭性小,无显著创伤;②由于外周血稀释以及骨髓瘤细胞的灶性分布,骨髓标本浆细胞比例准确性不高,CTPC绝对计数更为精准;③在MM诊断中,CTPC与骨髓瘤负荷具有相关性[1,3]。研究表明CTPC是MM的一个独立可靠的预后指标,对MM的诊断、判断预后及复发具有重要意义。但是,关于MM患者CTPC免疫表型的研究甚少。本研究主要通过对CTPC与骨髓检测结果的比较,探讨CTPC数量和免疫表型在MM临床评估中的意义。
对象与方法
1 研究对象 选取2016年12月~2020年8月苏州大学附属第一医院血液科初诊为多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的患者75例,中位年龄为58岁,男41例,女34例,诊断符合我国国内MM诊断标准。其中,CTPC–组为15例,中位年龄为58岁,男9例,女6例;CTPC+组为60例,中位年龄为57.5岁,男28例,女32例。两组在性别和年龄上进行统计分析,结果无统计学差异(P>0.05),具有可比性。
2 仪器与试剂 流式细胞仪:型号Navios(Beckman coulter公司,美国)。试剂:Kappa-FITC和Lambda-PE(Dako公司,丹麦),CD138-APC、CD38-APC750、CD45-KO、CD19-ECD、CD56-PC7、CD27-PB、CD81-APC700、CD117-PC5(Beckman coulter公司,美国),氯化铵溶血剂(QIAGEN公司,美国),破膜剂Intracell(Dako公司,丹麦)。
3 方法
3.1 十色流式细胞术:对初诊患者采集外周血和骨髓各2 mL,均采用EDTA-K2进行抗凝。取500 μL患者骨髓或外周血,按比例(1∶10)加入氯化铵溶血剂,漩涡振荡混匀,静置15 min;……
