杨晓亚 高裕华 刘素蕊 李烛

PRP是自体抗凝血经离心、分离制备的血小板浓缩物，其中高浓度的血小板活化后可释放大量的生长因子，能有效促进组织愈合、细胞再生。自体PRP在临床应用广泛：可用于治疗骨性关节炎、肌腱损伤、韧带损伤；牙种植、牙槽骨重建；还可用于慢性难愈合创面如糖尿病足、烧烫伤的治疗[1-4]。血小板的常规保存时间最长不超过5天，PRP使用指南、制备技术手册都明确指出，PRP的制备需要“使用前床边制备，制备后即刻使用”[5-7]。自体PRP治疗的单次用量不大，如关节腔内PRP注射治疗膝骨关节炎，推荐注射剂量3～8 mL[7,8]；自体PRP凝胶治疗糖尿病足溃疡单次用量5～10 mL[3,9]。对于多数疾病，自体PRP治疗需多个疗程。因此，几十毫升新鲜全血制备的PRP只能满足单次治疗，临床进行自体PRP治疗需要频繁采血，对患者及医护人员来说都有一定的负担。而用全自动血液成分分离机单采血小板，单次最多可采250 mL浓缩血小板，能满足多次PRP治疗所需。也有单位应用冷冻保存的PRP用于后续治疗，本研究以体外骨关节炎模型着手，旨在探讨不同冻存方法对PRP发挥生物学效应的影响，为合理利用自体PRP技术，保证临床治疗效果提供实验依据。

材料与方法

1 主要设备及试剂 全自动血液成分分离机（四川南格尔XCF3000）及其配套管路。人血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF）、人转化生长因子β（Transforming Growth Factor-β，TGF-β）、胰岛素样生长因子1（Insulin like Growth Factor，IGF-1）及人IL-6 ELISA检测试剂盒购自浙江联科生物有限公司，人血小板衍生生长因子AB（Platelet Derived Growth Factor AB，PDGF-AB）ELISA检测试剂盒购自美国Raybiotech公司。人SW1353细胞株（人软骨肉瘤细胞）购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。……