田洪民 王淑屏 王鸿雁 卢宪梅（济南市第三人民医院小儿科，济南250132）

坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）是一种多因素引起的严重威胁新生儿健康的消化系统疾病，能引起严重的肠道炎症，其相关死亡率一直较高（20%～30%）［1］。NLRP3炎性小体（NOD-like receptor family pyrin domain-containing 3）作为一种蛋白复合物，由上游NLRP3、凋亡相关斑点 样 蛋 白（apoptosis-associated speck-like protein，ASC）以及下游半胱天冬酶-1（Caspase-1）组成。适度激活NLRP3能引起机体固有免疫反应，但过度激活将引发一系列炎症性疾病［2］。研究表明，NLRP3参与NEC发展过程中的炎症反应，因此有效抑制NLRP3炎性小体的活化或许可以为治疗NEC新药的研发提供思路［3］。柚皮素（naringenin，NAR）是一种具有抗炎抗氧化以及抗菌作用的黄酮类化合物，广泛存在于柚、葡萄柚和酸橙中，具有预防心血管疾病、癌症等多种疾病的生理活性［4］。研究发现，柚皮素能通过抑制NLRP3炎性小体激活保护重症急性胰腺炎相关的心肌损伤，但柚皮素是否能通过抑制NLRP3炎性小体介导的炎症反应改善NEC肠道炎症损伤目前尚不明确［5］。因此，本研究拟探讨柚皮素对NEC肠道炎症损伤的作用及其对肠道组织NLRP3炎性小体活化的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂和仪器 柚皮素标准品（纯度＞98%）和脂多糖均购自美国Sigma公司；TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光）购自上海碧云天生物技术公司；TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18 ELISA试剂盒购自南京建成生物工程研究所；TRIzol试剂购自美国Thermo Fisher Scientific公司；逆转录试剂盒购自美国Promega生物公司；抗体兔抗NLRP3、ASC、Caspase-1和GAPDH均购自英国Abcam公司；希玛AR-8100氧气浓度检测仪购自深圳富兰克电子有限公司；荧光显微镜购自日本奥林巴斯公司；……