邢青华，邹超霞，魏耀昶，张瑞门，潘 雨，石德顺，邓彦飞

（广西大学动物科学技术学院，广西南宁 530004）

现阶段，核移植技术仍是哺乳动物克隆最有效的方法，该技术的发展为拯救濒危动物、生产可供人类移植的器官、某些药物原料等提供了发展方向[1]。1977 年克隆羊Dolly 诞生，表明成年哺乳动物的体细胞不仅具有基因组的全能性，还能在卵母细胞质中恢复到发育的起始状态，完成整个个体的发育[2]。但核移植效率低下，一般仅为1%～6%[3]。在核移殖技术中，供体细胞准备是核移植技术中关键的一环。鉴于此，可通过探索不同条件的供体细胞去提高克隆效率。

供体细胞初始表观遗传修饰的类型和模式显著影响体细胞核移植胚胎的发育能力[4]。DNA 甲基化和组蛋白乙酰化作为体细胞核移植重编程的重要过程，在自然条件下，帮助精子和卵母细胞的细胞核到达全能性状态[5]。一方面，DNA 甲基化作为细胞分裂遗传的表观遗传标记，维持细胞记忆[6]。另一方面，适当的去甲基化可以降低基因表达并恢复细胞分化和发展。而组蛋白乙酰化通常与转录允许状态相关，组蛋白H3 的乙酰化水平通过引起染色质解聚，从而促进体细胞重编程[7]。因此，本研究从不同年龄的水牛耳组织成纤维细胞入手，分析不同年龄水牛成纤维细胞的增殖能力，检测细胞DNA甲基化和组蛋白乙酰化水平，为水牛体细胞克隆等研究提供理想的实验材料。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 主要样品 3 月龄胎儿水牛、新生水牛、10 岁龄水牛耳部成纤维组织，牛只来源于南宁市鲁班路肉联厂和崇左市农户。……