转基因番木瓜基因组DNA的快速制备和PCR 检测方法
2021-08-11潘志文陈伟庭高洁儿周峰姚涓王声斌姜大刚
潘志文 陈伟庭 高洁儿 周峰 姚涓 王声斌 姜大刚
(农业农村部植物及植物用微生物生态环境安全监督检验测试中心(广州)/华南农业大学生命科学学院,广州 510642)
自1996年转基因作物商业化以来,创造了巨大的经济效益和生态效益,为全球的粮食安全、气候变化和环境可持续发展做出了巨大贡献。全球转基因作物种植规模日益扩大,根据国际农业生物技术应用服务组织(International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications,ISAAA)发布的报告,2018年全球转基因作物种植面积接近2亿 hm2,主要包括玉米、大豆、棉花等[1]。在我国,商业化种植的转基因作物主要包括转基因棉花和转基因番木瓜。
番木瓜(Carica papaya L.)又名木瓜,是著名的“岭南佳果”。番木瓜生育期内易受病害侵染,番木瓜环斑病毒(papaya ring spot virus,PRSV)的肆虐,导致全球各地的番木瓜品质和产量大幅度降低,严重影响相关产业的发展。1991年,Fitch等[2]将PRSV病毒编码外壳蛋白(coat protein,CP)的基因片段转入番木瓜,培育出抗环斑病毒病的转基因番木瓜55-1等品系,并于1998年5月在夏威夷商业化生产。由我国自主研发的转基因番木瓜“华农1号”品系[3],也于2006年获得安全证书并准许商业化生产。Cheng等[4]研发的转基因番木瓜GM YK品系也在田间表现出优良的抗性。鉴于转基因番木瓜已经在我国批准商业化生产,并且具有较大的市场份额,为保护消费者的知情权和选择权,加强对转基因番木瓜的监管,建立和优化快速、准确的检测方法非常必要。
在转基因作物的检测方法中,基于PCR的核酸检测方法被广泛应用。合适的DNA提取与纯化方法在很大程度上决定了PCR检测的准确性与可靠性[5]。……
