周 瑶，李 晶

(1. 湖北科技学院药学院，湖北 咸宁 437100; 2. 湖州师范学院医学院，浙江 湖州 313000)

宫颈癌是全球女性中第四大常见癌症[1]，也是很多国家女性肿瘤患者死亡的第三大原因。目前宫颈癌的治疗手段包括手术、放疗和化疗，效果有限，复发率高，各种副作用大。据报道，鞣花酸是一种多酚类物质[2]，是没食子酸的二聚体衍生物，具有反式没食子酸的单宁结构，具有各种活性，包括抗炎、抗氧化、抗病毒和抗癌活性[3]，但鞣花酸对宫颈癌细胞的杀伤作用及其机制目前报道尚少。我们推测鞣花酸可抑制人宫颈癌细胞探讨鞣花酸对宫颈癌细胞的作用及分子机制，探索新的潜在治疗方法对于加强宫颈癌的防治具有十分重要的意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1试剂 GRP78(#3177)、CHOP(#2895)、PERK(#5683)、pPERK(#3179)、Bcl-2(#15071)、Bax(#5023)、cleaved caspase-3(#9661)、β-actin(#3700)抗体购自美国CST公司；IRE1(ab37073)、p-IRE1(ab124945)抗体购自美国Abcam公司；鞣花酸(#E2250)购自美国Sigma公司；DMEM培养基，购自美国HyClone公司；BCA蛋白定量试剂盒，购自VazymE公司。

1.1.2仪器 凝胶成像系统(上海嘉鹏科技有限公司)；电泳槽、电转膜仪(伯乐生命医学产品有限公司)；多功能酶标仪(北京楠华科技开发有限公司)；超净工作台(吴江市伟峰净化设备有限公司)；恒温空气浴摇床(上海晶坛仪器制造有限公司)；细胞CO2培养箱(Thermo公司)；CKX41倒置相差显微镜(日本OLYMPUS公司)。

1.2 方法

1.2.1鞣花酸的配制 用DMSO溶解鞣花酸，使其达到100 mmol·L-1作为母液，用DMEM稀释成工作液，涡旋混匀后使用。

1.2.2细胞培养 Hela细胞株购自中国科学院上海细胞库(中国上海)。细胞是在Dulbecco改良的Eagle培养基(Invitrogen)中添加10%胎牛血清、100 kU·L-1青霉素和100 g·L-1链霉素培养于37 ℃、5% CO2的湿化培养箱中。……