吕晓楠，宗春辉，董 铮

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是常见的糖尿病微血管并发症，也是导致终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)的主要病因之一，严重危害人类健康[1]。根据世界卫生组织估计，到2040年糖尿病患者将增至6亿，其中约1/3将发展至DKD[2]。足细胞是肾小球内脏上皮细胞，是构成肾小球滤过屏障的重要部分。DKD与糖尿病早期肾小球足细胞受损密切相关，其中足突的形态、数量、相关蛋白的表达等方面的改变与DKD的发生发展存在密切关系[3]。研究发现，在一定刺激作用下，足细胞会出现上皮-间质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)的表型变化[4]，而EMT是DKD中发生纤维化的重要机制[5]。

中医中药在治疗肾脏疾病中具有一定优势，近年来发现低聚原花青素(Oligoprocyanidins，OPC)具有抗氧化、清除自由基、抗衰老作用。越来越多的证据表明，OPC可能对预防糖尿病并发症具有一定作用[6,7]。本课题组前期证实了OPC可减少大鼠的氧化应激、抑制炎性反应[8]。本研究在前期研究基础上探索OPC对DKD大鼠的肾脏病理改变和EMT作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料 OPC提取物购自天津尖峰药业有限公司；链脲佐菌素 (Streptozotocin,STZ)(美国Sigma公司)；代谢笼(韩国JeungdoBio&Plant公司)；RIPA裂解缓冲液(P0013B)，蛋白酶抑制剂混合物(P1005)购自上海碧云天公司；一抗抗体TWIST1(CST，1∶1000)、E-cadherin(CST，1∶1000)、Vimentin(CST，1∶1000)蛋白均购自Cell signaling公司。葡萄糖、血尿素氮和肌酐试剂盒均购自美国Abcam公司；尿白蛋白试剂盒购自美国Bethyl公司。光学显微镜购自日本Olympus；超薄切片机(德国莱卡)，透射电子显微镜(H-7700，日本日立)，环氧树脂Araldite M购自美国Sigma公司。

1.2 实验动物 选取5周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只，体重(180±20)g，由军事医学科学院实验动物研究所提供。在22～24 ℃的光/暗循环中饲养12 h。……