鲅鱼加工副产物水解液中ACE 抑制肽分离纯化研究
2021-08-07章禹航韩颖张唯嘉黄光荣
章禹航,翟 雨,韩颖,张唯嘉,冯 涛,黄光荣
(中国计量大学生命科学学院,浙江杭州 310018)
血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE) 抑制肽,可以阻止血管紧张素II 的生成,从而起到降低血压的作用,是近年来研究比较多的一种生物活性肽,最早于1970 年由Ferreira S H等人[1]从毒蛇毒液中分离得到。如今,已有大量报道从动植物组织中获得并鉴定的ACE 抑制肽,且有部分已商业化应用。从动植物组织中获得ACE 抑制肽通常有2 种手段:直接分离纯化天然ACE 肽,或者是以组织蛋白质为原料进行酶解获得ACE 肽。海洋鱼类种类众多,是制备ACE 抑制肽的良好来源之一[2-4]。鲅鱼,学名“蓝点马鲛”(Scomberomorus niphonius),作为一种低价值的海洋鱼类,以鲜食和初级加工为主,精深加工利用的报道相对较少。目前,在鲅鱼加工副产物制备生物活性肽方面,主要有抗氧化肽[5-7]、抗菌肽[8]、矿物质结合肽[9]等。以鲅鱼加工副产物为原料,先经脱脂后得到鱼粉蛋白,再经碱性蛋白酶酶解,最后经超滤、层析分离和高效液相色分离得到纯度较高的具有较强ACE 抑制活性的小肽,为下一步氨基酸序列鉴定提供基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
鲅鱼加工副产物,浙江舟山某企业提供,实验室冷冻保存;碱性蛋白酶,酶活力为200 U/mg;DEAE-Sepharodse FF、Sephacryl S-100 等,美国GE公司提供;HHL,生化纯;乙腈、甲醇、三氟乙酸等为色谱纯,乙酸乙酯、无水硫酸铜、福林酚、石油醚、乙醇、三羟甲基氨基甲烷(Tris) 等,均为分析纯。
1.2 仪器与设备
Allegra X-30 型高速冷冻离心机,美国Beckman公司产品;DGG-9140B 型鼓风干燥箱,上海森信实验仪器有限公司产品;RV-10 型数显型旋转蒸发仪,德国IKA 公司产品;……
