冯 秀,陈 颖,王以浪

(1南通大学第二附属医院肿瘤科,南通 226001;2南通大学附属肿瘤医院肿瘤内科;*通讯作者,E-mail:1764119488@qq.com)

肿瘤微环境(tumor microenvironment，TME)由包括成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞、前体细胞、癌细胞在内的异质细胞以及细胞外环境组成，这些细胞类型及环境的变化可影响肿瘤的生长和转移[1-3]。间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)具有多向分化潜能，是TME的重要构成部分，对肿瘤的发生和转移具有重要影响[2]。肿瘤相关性成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts，CAFs)在促进和维持癌症方面具有重要作用，其来源的主要前体细胞是骨髓和脂肪成纤维细胞及间充质干细胞[4,5]。Aurora-A在多数细胞类型中均有表达，在调节细胞周期从G2期到胞质分裂过程中具有极其重要的作用，在已有的研究中发现，Aurora-A作为癌基因在肝癌等多种肿瘤中发挥促癌作用[6]。目前关于Aurora-A在肿瘤中的作用机制研究甚多，但关于其对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响是否可能与其参与调控MSCs向hCAF转化有关还未可知，因此，本研究通过对其研究，以期为Aurora-A在HepG2中的功能机制研究提供进一步的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试剂和仪器

hAD-MSCs细胞(货号：ZQ0309)、DMEM培养基(货号：ZQ-100)购自上海中乔新舟生物科技有限公司；HepG2细胞系(货号：CL-0103)购自武汉普诺赛生命科技有限公司；细胞增殖及毒性检测试剂盒(Cell counting Kit-8，CCK-8，货号：BB-4202)购自上海贝博生物科技有限公司；LipofectamineTM2000 Transfection Reagent(货号：11668027)、NC和shRNA慢病毒质粒购自赛默飞世尔科技；兔抗人Aurora-A抗体(货号：abs110826-50ul)购自爱必信(上海)生物科技有限公司；兔抗人α-SMA、Desmin、FSP、GAPDH、山羊抗兔IgG二抗抗体(货号：K10018-WXC、K14063-KHR、K28020、K16389-KDP、WE0381-QAN)均购自北京百奥莱博科技有限公司；……