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过敏性紫癜患儿呼吸道病毒感染特异性免疫球蛋白M检测及血清炎性因子变化

2021-07-30刘力铭赵子年杨金玉焦丽华刘建丽回广飞

临床军医杂志 2021年7期
关键词:病毒感染特异性试剂盒

刘力铭,张 颖,赵子年,杨金玉,焦丽华,刘建丽, 回广飞

唐山市妇幼保健院1.儿科;2.血液科,河北 唐山 063000;3.滦州市卫生职业中等专业学校 教务处儿科教研室,河北 滦州 063700;4.北部战区总医院 药学部,辽宁 沈阳 110016

过敏性紫癜(henoch schonlein purpura,HSP)是以过敏性血管炎性为主要病变的自身免疫性疾病,主要侵犯皮肤、黏膜和毛细血管等[1-2]。HSP发病机制至今尚不清楚。有研究报道,HSP被认为是由细菌、病毒或原生动物感染后形成的免疫复合物引起的,大约50%的HSP患者已感染上呼吸道感染,并已报告HSP与链球菌、腺病毒、细小病毒和支原体有关[3]。呼吸道病毒感染人体后1~2周内,免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)M急剧升高,2~3周达到高峰特异性,为临床早期确诊提供可靠依据[4]。王娟等[5]发现,肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在HSP患儿急性期血清中的水平显著上升,并可能引起血管炎。本研究旨在探讨HSP患儿呼吸道病毒感染特异性IgM检测及血清炎性因子水平的变化。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取自2015年1月至2018年8月于唐山市妇幼保健院住院治疗的360例HSP患儿为研究对象。其中,男性210例,女性150例;年龄3~14岁,平均年龄(8.61±3.75)岁。纳入标准:符合《诸福棠实用儿科学》关于HSP的诊断标准[6];近2周内未服用抗过敏药物;未患有其他合并影响结果的疾病。排除标准:有未知过敏原过敏病史;有严重基础疾病(呼吸、神经、心脑血管等疾病);存在IgA肾病、肾小球等原发或继发性肾疾病。另选取同期于本院体检的360例健康儿童作为健康组,其中,男性218例,女性142例;年龄2~15岁,平均年龄(8.09±4.26)岁。两组研究对象的一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准。所有患儿家属均签署知情同意书。

1.2 主要试剂及仪器 9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒,郑州安图生物工程股份有限公司;白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒(YM-QP10157)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)ELISA试剂盒(YM-QP10156),上海远慕生物科技有限公司;Hyperion MicroReader Ⅲ型酶标仪,美国Hyperion公司;BN 100特种免疫球蛋白检测仪,德灵公司;莱卡DM500荧光显微镜,德国莱卡有限公司。

1.3 研究方法

1.3.1 血清中呼吸道病毒IgM检测 所有受试者均空腹12 h后,清晨抽取静脉血4~5 ml,装于普通采血管中,静置35 min后,4 000 r/min离心15 min,收集血清,保存于-20℃备用。采用间接免疫荧光法检测受试者血清中腺病毒(adenovirus,ADV)、副流感病毒(parainfluenza,PIV)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytin virus,RSV)、甲型流感病毒(influenza a virus,IAV)、乙型流感病毒(influenza B virus,IBV)的特异性IgM水平,在荧光显微镜下观察结果。阳性结果判读严格按照说明书进行。2种以上病毒感染为混合感染。

1.3.2 血清中炎性因子水平检测 采用ELISA法检测TNF-α、IL-2、IL-10水平,分别选用TNF-α、IL-2、IL-10 ELISA试剂盒。

2 结果

2.1 HSP组患儿血清常见呼吸道病毒抗体IgM检查情况 360例HSP患儿呼吸道病毒感染特异性IgM阳性标本118例,检出率32.78%(118/360)。其中,IBV特异性IgM检出64例,检出率17.78%(64/360),阳性检出率最高;IAV特异性IgM检出44例,检出率12.22%(44/360);RSV特异性IgM检出42例,检出率11.67%(42/360);PIV特异性IgM检出41例,检出率11.39%(41/360);ADV特异性IgM检出24例,检出率6.67%(24/360)。

2.2 呼吸道病毒混合感染情况 118例HSP呼吸道病毒感染特异性IgM阳性患儿血清同时检出2种呼吸道病毒特异性IgM阳性59例,检出率为50.00%(59/118),分别为ADV+PIV 1例,ADV+ RSV 3例,ADV+ IAV 2例,ADV+ IBV 7例;PIV+ RSV 8例,PIV+IAV 10例,PIV+IBV 4例;RSV+ IBV 12例;IAV+IBV 12例。同时检出3种呼吸道病毒特异性IgM阳性16例,检出率为13.56%(16/118),分别为IBV+PIV+RSV 4例,IBV+PIV+IAV 4例,IBV+ADV+RSV 3例,IBV+ADV+IAV 2例,IBV+ADV+PIV 1例,ADV+PIV+RSV 1例,ADV+PIV+IAV 1例。其中,IBV混合其他病毒感染共35例,检出率为29.66%(35/118)。

2.3 HSP组及健康组血清TNF-α、IL-2、IL-10水平比较 HSP组患儿血清IL-2水平低于健康组,TNF-α、IL-10水平高于健康组,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 HSP组及健康组血清TNF-α、IL-2、IL-10水平比较

3 讨论

HSP是自身免疫性血管炎综合征,可引起心、脑、肾等重要器官损坏,也可并发心律失常、肺出血、心肌炎、颅内出血等[7]。HSP在春冬季高发,呼吸道感染在此季节也是高发期,因此,推测呼吸道病毒感染可能与HSP发病密切相关。

HSP患儿临床表现有急性上呼吸道或下呼吸道感染,常见的呼吸道病毒主要有ADV、PIV、RSV、IBV、IVA。国外研究报道,大约有50%的HSP患儿发病前有呼吸道感染[8]。因此推测呼吸道病毒感染与HSP发病之间可能存在一定关系。王亚坤等[9]研究发现,儿童急性呼吸道感染的病毒病原特征中,RSV在病毒阳性标本中占主要比例,约占65.6%;其次是PIV,约占19.1%。朱益飞等[10]研究报道,在150例急性呼吸道感染患儿中,阳性病毒检出率为78.67%,其中,最为常见的是流感病毒,约占36.44%,RSV占26.27%,ADV占11.02%。本研究发现,360例HSP患儿血清中呼吸道病毒感染特异性IgM阳性检出率为32.78%,其中,IBV阳性检出率最高,其余依次为IAV、RSV、PIV及ADV。王加芬等[11]研究发现,在呼吸道感染患儿2种或3种呼吸道病毒特异性IgM阳性检出率为26.24%,同时有3种呼吸道病毒特异性IgM阳性检出率为4.18%。有研究报道,HSP患儿体内存在免疫功能紊乱现象[12]。T细胞在机体免疫功能中起中心调控作用。

综上所述,HSP患儿血清炎性因子IL-2水平下降,IL-10、TNF-α水平升高,血清中常见呼吸道病毒感染,其中,IBV检出率最高。但本研究由于研究区域和样本数量有限,还需进一步加大样本数量和研究区域进行研究,深入探讨呼吸道病原感染影响HSP的发病机理。

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