崔 鑫，张 宁，陆 辉，于月新

北部战区总医院 生殖医学中心，辽宁 沈阳 110016

战时男性泌尿生殖系统伤害发生率高[1-2]，骨盆个人防护装备、护腹股沟合成内衣、凯夫拉板等防护装备可对泌尿生殖系统起到一定的保护作用[3]。当睾丸受到破坏性损伤时，立即从精囊或残余输精管中收集抢救精子并进行冷冻保存，复苏后用于体外受精胚胎移植，可使受伤官兵获得自己的后代[4-5]。本研究旨在探索战时泌尿生殖系统损伤后污染精子的收集及纯化方法。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取2019年1月1日—5月1日于北部战区总医院生殖医学中心门诊就诊的500例男性志愿者为研究对象。纳入标准：禁欲2～7 d，手淫取精后精液体积≥3 ml。研究对象平均年龄(25±5)岁。所有研究对象均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 实验方法

1.2.1 1.6%感染率污染模型制备 收集志愿者精液，随机每10份为1组。选取自然环境中土壤、砂子、树叶、污水、血液、灰尘，分别选取采样点5处，将精液与上述污染物混合备用(污染精子原液)。前期建立1.6%感染率污染模型(200例志愿者)，从0.1%庆大霉素加入精子洗液起始，根据除菌效果，逐渐升高加入的庆大霉素浓度，找到除菌效率高的加入下限后停止浓度摸索。将精液标本随机分为两组，密度梯度法组和上游法组。

1.2.2 除杂质沉淀污染精子中大量固体杂质 吸取污染精子500 μl于2 ml离心管中，将含庆大霉素的精子洗液1 000 μl缓慢加于污染精子上层，避免吹起精液层，37℃恒温箱上游30 min。

1.2.3 密度梯度法 进一步除杂质及死精子。……