徐世民，王炳武，张晓霞，刘伟强，于明东，苏保辉，高加智

（山东省潍坊市人民医院脊柱外科，261041）

腰椎间盘退行性病变（lumbar degenerative dis⁃ease,LDD）是临床常见疾病，它是由腰椎间盘的生理结构退行性病变引起腰椎间盘突出、椎管狭窄等病理改变，导致患者出现腰痛、下肢麻木、大小便障碍等临床症状［1］。据统计，全球每年有2.66亿人患有LDD，发病率为3.63%［2］，超过一半的人在生活中会受到腰背痛的影响［3］。随着对腰椎间盘退变认识的进展，包括影像学检查和干预试验等被应用到不同的方面，以推测LDD的病因［4，5］。腰椎间盘的退变具有很强的遗传性，细胞行为和细胞外基质的结构是否完整均由遗传信息所决定［6］。因此，本研究从此角度出发，探讨LDD与TRAIL基因之间的相关性及TRAIL基因的临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象

腰椎间盘髓核取自人体。其中，2019年7月—2020年7月手术治疗的腰椎间盘突出症60例患者为退变组，男32例，女28例，年龄32～64岁；同期因腰椎创伤手术，但椎间盘无退变的60例患者为未退变组，男49例，女11例，年龄26～57岁。将取出的髓核分成两部分，一部分用于制作石蜡切片，一部分用于髓核细胞的分离培养。本研究已预先通过本院伦理委员会批准并书面同意，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 组织化学染色

1.2.1 染色

髓核组织固定、脱水、浸蜡后制备蜡块，切5μ的石蜡切片。切片脱蜡、复水后行组化染色。

Tunel（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）法检测细胞凋亡，用50 μl末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）和450 μl地高辛标记的dUTP液混匀，而阴性对照组仅加50 μl地高辛标记的dUTP液，阳性对照组先加入100 μl DNase1，15～25℃反应10 min，后面步骤同处理组。……