张丹，郭勇，岳以英，彭静，胡俊喜

视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,Rb）是一种儿童最常见的眼部恶性肿瘤，由视网膜未成熟细胞转化发展而来[1]。全球每15,000～20,000 个儿童中就有1 例发病，每年新增约有9,000 例患儿[2]。目前针对双眼Rb 的主要治疗方法包括化学疗法和局部疗法[3]，但是因为诊断不及时及耐药性等因素导致预后不理想。因此，阐明耐药性机制并寻找新的治疗靶标具有重要意义。微小RNA(microRNA,miRNA)是小的非编码RNA，长度约为19～25 个核苷酸，通过与靶标mRNA 的3' 端非编码区（3'untranslated regions，3'-UTR）结合并诱导转录抑制或降解来调节基因表达，在多种癌症中出现失调[4]。在喉鳞状细胞癌中，miRNA-4497 可以通过负调控GBX2 起到抑癌作用[5]。然而miRNA-4497 在Rb 中的研究甚少，最近研究表明，miRNA-4497 在Rb 中高表达[6]，但其具体功能尚不明确。本研究将探讨miRNA-4497 对Rb 细胞增殖及耐药的影响，并探究其分子机制。

1 材料与方法

1.1 标本来源

本研究所用到的27 例Rb 患者肿瘤组织及瘤旁视网膜组织标本，收集于2017 年1 月—2019 年12 月新乡医学院第一附属医院、第四军医大学唐都医院、天津市眼科医院、西安市第四人民医院4 家医院眼科经病理确诊为Rb 的患者。这项研究得到了医院的机构审查伦理委员会的批准，并且所有参加者均在注册后批准并签署书面知情同意书。

1.2 材料与仪器

人Rb 细胞株Y79 购自美国模式培养物集存库（ATCC）；RPMll640 培养基、胎牛血清均购自美国HyClone 公司；双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自美国Promega 公司；注射用奥沙利铂购自齐鲁制药(海南) 有限公司；CCK8 试剂盒购自日本同仁公司；GAPDH、PEA15 抗体及山羊抗兔IgG 购自美国Cell Signaling Technology（CST）公司；……