孙坤秀，胡志刚，成玉梁，于航，谢云飞，姚卫蓉，郭亚辉*，钱和

（1.江南大学食品学院，食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡214000；2．无锡市儿童医院医学检验科，江苏无锡214000）

荧光分析是一种利用物质受到光照射而发射荧光的特性对物质进行定性或定量分析的方法。荧光测量可大体分为稳态光谱测量和时间分辨光谱测量。稳态光谱测量是采用时间尺度较长的连续光源激发样品并连续收集样品发射出的荧光信号；时间分辨荧光分析技术（time-resolved fluorescence analysis，TRFA）是用时间尺度很短的脉冲光照射并利用高速检测设备反复收集样品发出的单电子荧光信号，得到荧光衰减谱，因此稳态光谱测量从概念上可以看作是时间分辨荧光在一定时间内的叠加[1]。而且稳态光谱由于荧光强度的衰减，激发光源需要持续照射荧光物质，并且需要使用单色器来屏蔽激发光和杂散光等；而TRFA使用镧系螯合物，利用这类荧光物质的荧光寿命长及斯托克斯（Stokes）位移大的特点，通过波长和时间两种分辨，有效排除了非特异性荧光信号的干扰，具有灵敏度高、稳定性好、标准曲线线性范围宽等优点，目前TRFA是最有发展前途的超微量检测分析技术[2]。

1 TRFA的原理及特点

1.1 TRFA技术原理

TRFA是一种以镧系元素及其复合物（如掺杂无机材料、螯合物等）作为荧光标记物（代替荧光物质、同位素或酶），建立的一种新型的非放射性微量荧光分析技术。该技术利用镧系元素标记信号分子，用时间分辨技术同时对波长和时间两个参数进行信号分辨，以实现高灵敏分析测定[3]。……