陈强 刘立凤 高越

光动力疗法（PDT）是利用肿瘤细胞的高代谢特点来治疗肿瘤的一种新方法，其原理是光敏剂可以选择性地进入肿瘤细胞并被特定波长的光激活，引起一系列光化学反应，产生单线态氧和自由基，从而杀死肿瘤细胞［1］。血卟啉单甲醚（HMME）是常用的光敏剂，其介导的PDT已广泛应用于整形美容、细菌感染及恶性肿瘤的治疗［2-4］，通过特定波长的激光来激活HMME可以产生肿瘤杀伤效应，在内窥镜PDT治疗中激光纤维通过内窥镜活检通道进入腔道，造成肿瘤的原位破坏而正常组织不受损伤，具有毒性局限、损伤小的特点，且反复PDT治疗不易产生耐药性［5］，目前用于胃癌的治疗研究较少，本实验旨在研究HMME-PDT对胃癌细胞MGC-803的生长抑制作用。

1 材料与方法

1.1 试剂与光源 血卟啉单甲醚（冻干粉状态）购自上海先锋药业有限公司，其最佳吸收光谱为630 nm［6］，胃癌细胞MGC-803系获自哈尔滨医科大学细胞中心，RPMI-1640培养基和胎牛血清（FBS）均购自美国Hyclone Laboratories公司，链霉素和青霉素均购自苏州碧云天生物技术公司，ApoAlert Annexin V-FITC试剂盒购自美国BD生物科技公司，细胞计数试剂盒8（CCK8）购自武汉博斯特生物工程有限公司。选用的光源为二极管激光器（日本东京三洋电机株式会社），其最大输出功率为260 mW，波长为635 nm。光通过具有0.8 mm圆柱形扩散尖端的光纤施加器分布，照射前将输出功率调整为50 mW，并将产生的光线进行光学准直至直径为0.8 cm的光斑尺寸。激光输出能量用功率计仔细校准，以避免过度曝光。

1.2 细胞培养 将胃癌细胞MGC-803接种于含有10%胎牛血清、50 μg/ml链霉素和50 μg/ml青霉素的RPMI-1640培养基中，置于37 ℃、含有5%CO2的湿润培养箱中进行培养，取对数生长期细胞用于实验。……