杨婷，李娅娴，李亚东，严皎，王永蓉，赵勇，文瑜，杜宋婷，刘正玲

中国医学科学院医学生物学研究所，云南昆明650503

目前，ELISA法已广泛应用于医疗、生产实践及科研中，针对抗原或抗体的检测方法具有高度特异性、灵敏度及高通量等特性。稳定性是体外诊断试剂必备的基本属性，是确保产品在使用过程中安全有效的重要指标［1-2］，相关研究是体外诊断试剂盒注册申报资料中重要内容之一，也是确定试剂盒保存条件、有效期的唯一依据［3］。

包被固相载体的抗原在环境中的稳定性是影响ELISA试剂盒质量的重要因素。DESHPANDE［4］研究证实，抗原结合在聚苯乙烯塑料表面10 d后，约90%的抗原位点发生变性。选择能够延缓固相抗原抗体变性的环境条件是延长检测板有效期、维持稳定性的便捷手段。ELISA试剂盒的生产和贮存过程中，通常采用干燥和低温环境来延长检测板的贮存期，目前多家企业开发出相应的ELISA检测体系进行肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）抗原定量检测［5-6］，其中检测板多为干燥密封保存于-20或-60℃以下的预包板，或现包现用检测板，鲜有采用缓冲液进行湿保存预包板的相关研究。因此，本研究采用干燥保存和湿保存两种方法保存EV71抗原含量检测板，于不同保存时间检测不同抗原含量的EV71样品，通过统计学分析，评价两种方法保存EV71抗原检测板的稳定性，以期为生产厂家及检定机构自制EV71抗原ELISA试剂盒提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 标准品及样品 EV71抗原检测国家标准品（20100701）购自中国食品药品检定研究院；……