柯萨奇病毒A2病毒样颗粒的制备、纯化及鉴定
2021-07-20禹玉婷胡岗罗志宇卢佳王泽鋆孟胜利申硕
禹玉婷,胡岗,罗志宇,卢佳,王泽鋆,孟胜利,申硕
武汉生物制品研究所有限责任公司,湖北武汉430070
手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒感染引起的一种病毒性疾病。HFMD在世界范围内出现多次暴发流行,以夏秋季常见。患者主要为学龄前儿童,尤以3岁以下年龄组发病率最高,临床表现为口腔黏膜、手足等多处疱疹,少数可引起脑炎、肺水肿、弛缓性麻痹、心肌炎和心脏衰竭等严重并发症,甚至导致死亡[1]。
引起HFMD的肠道病毒至少有20多个型,包括柯萨奇病毒A组(Coxsackievirus A,CV-A)的2、4、5、6、10、12和16型,柯萨奇病毒B组(Coxsackievirus B,CVB)的5个型,埃可病毒(Echovirus,Echo),肠道病毒71型(enterovirus 71,EV-A71)。CV-A2于1947年在美国特拉华首次分离得到原型株Fleetwood[2],基因结构分为5′非编码区、3′非编码区及位于非编码区之间的开放阅读框架。其编码区包含编码结构蛋白的P1区和编码非结构蛋白的P2、P3区。P1区编码4种衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4,除VP4包埋在病毒粒子外壳的内侧与病毒核心紧密连接外,其他3种结构蛋白均暴露在病毒颗粒的表面;P2和P3区编码7种非结构蛋白2APro、2BPro、2CPro、3APro、3BPro、3CPro和3DPro,与病毒RNA的复制和转录、病毒多聚蛋白的剪切、病毒颗粒的装配等功能相关。细胞表达的重组多聚蛋白P1被同时表达的3CDproC酶剪切为VP0、VP1和V-A4,装配为成分与病毒感染后的前颗粒(procapsid)相似的病毒样颗粒(viruslike particles,VLPs)。CV-A2主要引起疱疹性咽峡炎、脑炎、脊髓炎、心肌炎、心包炎、流行性胸痛、呼吸道感染、HFMD、婴儿腹泻等,引起暴发流行[3-7]。2008年中国台湾肠道病毒流行时,在221份采集样品中,73%(161/221例)为疱疹性咽峡炎,27%(60/221例)为HFMD[8]。2012年瑞典肠道病毒早期感染的随访中,CV-A2感染比例占9.6%,仅次于CV-A9(13.5%)和CV-A16(11.5%)[9]。CV-A2感染引起的疾病多数症状较轻、病程较短,且较少出现并发症或留下后遗症[10-12]。……
