陆晓东 姚安军 李静云 陈凌子 唐志苗 金霞云

食管癌是最常见的癌症之一，其死亡率居全球恶性肿瘤的第6位[1]。食管鳞状细胞癌是食管癌的主要病理类型，占食管癌病例的90%以上[2]。尽管手术治疗、放射治疗及化学治疗在食管鳞状细胞癌治疗方面取得较大进展，但食管鳞状细胞癌发病率和病死率依旧较高。因此，深入研究食管鳞状细胞癌发生、发展的分子机制具有重要的临床意义。miRNA是一类内源性非编码单链RNA，长度为21～24个核苷酸，具有高度保守性，参与调控癌细胞生长、分化、迁移、侵袭和凋亡等生物学过程，与肿瘤的发生、发展密切相关[3]。近年来大量文献表明，miRNA的异常表达参与食管鳞状细胞癌进程，如miRNA-134[4]、miRNA-34a[5]、miRNA-216a-5p[6]和 miRNA-204-5p[7]等，而miRNA-4429在食管鳞状细胞癌中的作用尚鲜见报道。基于此，本研究探讨miRNA-4429靶向结合髓样细胞白血病-1（MCL1）对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和仪器 人食管鳞状细胞癌细胞株（TE-13、KYSE140、EC9706、KYSE30）、293T 细胞株和人食管正常上皮细胞株Het-1A均购自上海中国科学院细胞库；RPMI1640 培养基（批号：21870084）、FBS（批号：10091148）和 DMEM 培养基（批号：11995065）均购自美国Gibico公司；模拟物对照（mimics NC）和miRNA-4429模拟物（miRNA-4429 mimics）均购自上海吉玛制药公司；脂质体转染试剂（批号：11668019）购自美国 Invitrogen公司；Trizol试剂（批号：R401-01）、凋亡检测试剂盒（批号：A211-01）、逆转录试剂盒（批号：MR101-01）和qRT-PCR试剂盒（批号：MQ101-01）均购自南京诺唯赞生物科技有限公司；Transwell小室（批号：3422）和Matrigel基质胶（批号：354248）均购自美国Corning公司；CCK-8试剂盒（批号：C0037）购自上海碧云天生物技术研究所；TBST缓冲液（批号：T1085）购自北京索莱宝科技有限公司；……