严万能 马海洁 乐婷 陈冬冬 李世波 张国强 王婕

肝癌是全球常见的恶性肿瘤之一，其中肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）死亡人数居世界癌症致死人数第3位，发病率列第6位[1]。随着近代分子生物学研究的进展，分子靶向治疗已成为除手术、放疗、化疗以外的第4种主要肿瘤治疗方式，并且相比传统化疗药物具有靶向性强和不良反应少的优点。目前索拉非尼和仑伐替尼已成为治疗晚期HCC的一线靶向用药，但其耐药性导致患者的5年生存率并不理想[2-3]。因此，寻找更加有效的HCC治疗靶标有着重要的临床意义。

在HCC发生、发展过程中，肝脏的一系列特异性代谢功能受损的同时又获得了新的代谢特征，肿瘤细胞恶性程度随之升高[4]，其中叶酸循环是主要的代谢失调通路之一[5]。叶酸循环涉及的主要代谢酶有亚甲基四氢叶酸脱氢酶1（methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 1 like,MTHFD1L）、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2（methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2,MTHFD2）及丝氨酸羟甲基转移酶2（serine hydroxymethyl transferase 2,SHMT2）等，其中MTHFD2是一种位于线粒体中的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性双功能酶，在线粒体叶酸代谢中呈高表达水平[6]。近年来多项研究表明MTHFD2的过表达可促进乳腺癌、结肠癌、胶质瘤等类型肿瘤的发生和发展，而关于MTHFD2对HCC细胞凋亡进程的影响仍是未知[7-10]。因此，本研究探讨MTHFD2对人HCC细胞凋亡的影响及其分子机制，以期为HCC患者的临床治疗研究开辟新的方向。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系与培养方式 人HCC细胞系HepG2和SMMC-7721均来自舟山医院细胞分子生物实验室；FBS与胰酶均购自美国Gibco公司，DMEM高糖培养基购自美国Hyclone公司。培养方式为含10%FBS的DMEM高糖培养基于37°C、5%CO2的细胞培养箱内培养，48 h后0.25%胰酶消化传代。……