下调脂滴包被蛋白2抑制人胃癌细胞系NCI-N87增殖
2021-07-19刘炼玲
刘炼玲,李 勇
(1.重庆市万州区人民医院 消化内科,重庆 404000; 2.重庆大学附属三峡医院 消化内科,重庆 404000)
胃癌(gastric cancer)是一种常见的消化道恶性肿瘤,发生于胃黏膜上皮,其发病率约占全球恶性肿瘤的7%,其病死率约占全球恶性肿瘤的9%[1]。手术切除联合辅助化疗是目前治疗胃癌的主要手段,然而对于出现侵袭、转移的病人其治疗效果不佳[2]。脂滴包被蛋白2(perilipin2)是一种能够调控脂质代谢的蛋白,保护脂肪组织,促进脂滴中三酰甘油(triglyceride,TG)的存储,为细胞增殖提供能量,并在膀胱癌、肾透明细胞癌、结肠癌等恶性肿瘤发病过程中有非常重要的作用[3]。但是,目前国内关于perilipin2与胃癌关系的报道较少,为此,本研究分析了perilipin2在胃癌中的表达及对肿瘤生物学行为的调控机制,希望从胃癌发病的分子机制方面探寻更为有效的诊疗方法应用于临床,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞来源:人正常胃黏膜细胞系GES-1(杭州美森细胞生物科技有限公司);人胃癌细胞系NCI-N87(上海中乔新舟生物科技有限公司)。
1.1.2 主要试剂: BCA蛋白定量试剂盒(Pierce公司);兔抗perilipin2、p62、keap1、Nrf2单克隆抗体(1∶500稀释,北京博尔西科技有限公司);HRP标记山羊抗兔IgG二抗(1∶2 000稀释,Sigma-Aldrich公司);ECL发光试剂盒(上海翊圣生物科技有限公司);NC-shRNA、perilipin2-shRNA重组慢病毒质粒(Axygen公司);CCK-8溶液(北京华泰昕生物医疗技术有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 细胞的分组及干预:将NCI-N87细胞分为对照组,转染10 μg NC-shRNA重组慢病毒质粒和转染10 μg perilipin2-shRNA重组慢病毒质粒,完成上述操作后继续培养48 h,转染操作按照LipofectamineTM2000转染说明书进行。
1.2.2 CCK8法检测细胞增殖率……
