秦建民，张来香，魏振英

(1.青岛市第八人民医院 眼科， 山东 青岛 266000； 2.青岛市中心医院 肝胆血管外科, 山东 青岛 266000；3.青岛市妇女儿童医院 新生儿童重症监护病房， 山东 青岛 266011)

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病的主要微血管并发症之一，也是世界范围内致盲的主要原因[1]。据统计，1型糖尿病患者视网膜病变患病率为24%～27%，2型糖尿病患者视网膜病变患病率为9%～16%，糖尿病患者失明率为0.2%～0.5%[2]。因此，了解DR发生的分子机制，寻找新的治疗方法至关常重要。微小RNA(microRNA，miRNA)是一类具有调节功能的短链非编码RNA，其通过抑制下游靶蛋白表达来降解mRNA，调节蛋白翻译，参与细胞的增殖、凋亡等生理和病理过程。目前对miRNA的研究主要集中在肿瘤中，对其在其他疾病中的研究较少。miR-193a-3p是一种肿瘤相关miRNA，miR-193a-3p在食管癌、胰腺癌等多种恶性肿瘤表达异常，参与对肿瘤细胞增殖、凋亡以及耐药等的调控[3-4]。研究显示高血糖状态下仔猪心外膜脂肪组织miR-193a-3p的表达发生改变，其表达异常可能与Ⅱ型糖尿病的发生有关[5]。于是推测miR-193a-3p可能参与人DR进展。视网膜内皮细胞凋亡是视网膜病变的早期病理表现之一，因此，本研究采用高糖诱导人视网膜内皮细胞(human retinal endothelial cells，HRECs)凋亡构建DR细胞模型[6-7]，研究miR-193a-3p在高糖干预的HRECs中的变化以及对HRECs凋亡的影响，以期为DR的治疗开辟新的途径。

1 材料与方法

1.1 材料

人视网膜内皮细胞HRECs系(美国模式培养物保藏所)；DMEM培养基和胎牛血清(Hyclone公司)；抑制物对照(anti-miR-NC)、miR-193a-3p抑制物(anti-miR-193a-3p)、模拟物对照(miR-NC)和miR-193a-3p模拟物(miR-193a-3p mimics)(上海吉玛制药有限公司)；PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002(Sigma-Aldrich公司)；……