杨汶川，韩 东，杨 帆

(临沂市第三人民医院，山东 临沂 276004)

肺癌(lung cancer)是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占所有肺癌病例的85%，以顺铂(dichlorodiammine platinum，DDP)为基础的联合化学药物治疗(简称化疗)是晚期NSCLC的重要治疗手段[1]。然而，顺铂耐药是影响化疗效果、导致治疗失败的主要原因。因此，了解NSCLC细胞的化疗耐药机制，制定有效治疗方案、提高生存率至关重要。长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一类长度大于200 bp的非编码RNA，具有多种功能和复杂的调控机制，参与了包括所有细胞增殖、凋亡和化疗耐药在内的多种生理或病理过程。LINC00607(long intergenic non-coding RNA00607)位于染色体2q35位点，肝癌中LINC00607表达降低，上调其表达可抑制肝癌细胞增殖，增加细胞凋亡和对阿霉素、5-氟嘧啶的敏感性[2]。肺腺癌中LINC00607表达下调可能与肺癌进展有关[3]。miR-372属于miR-371～373簇，研究显示miR-372上调与胃癌细胞DPP耐药有关，下调miR-372可抑制耐药胃癌细胞增殖，促进细胞凋亡，降低DDP耐药性[4]。序列分析发现miR-372是LINC00607的潜在靶序列，miR-372已被证实与NSCLC细胞的异常增殖和转移有关[5]。本研究通过分析NSCLC组织、人肺腺癌顺铂耐药细胞系A549/DDP中LINC00607、miR-372表达水平，探讨恢复其表达对A549/DDP细胞增殖和凋亡的影响，以期为临床DDP耐药NSCLC的治疗提供新的靶点。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞及试剂：人肺腺癌细胞系A549和顺铂耐药细胞系A549/DDP(中国典型培养物保藏中心)；DDP(Sigma-Aldrich公司)；RPMI-1640培养基、胎牛血清(Gibco公司)；LipofectamineTM2000、cDNA第一链合成试剂盒、Trizol试剂盒和SYBR Green Masker Mix(Invitrogen公司)；miRNA反转录试剂盒(GeneCopoeia公司)；miR-372模拟物(miR-372 mimics)及其阴性对照(miR-NC)、LINC00607过表达载体(pcDNA3.1-LINC00607)及其阴性对照(pcDNA3.1)、双荧光素酶报告载体(上海吉玛制药公司)；……