冷秋平 王文艺 陈丽萍

新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学科,新疆 乌鲁木齐 830002

难治性哮喘是指除外患者药物依从性和导致支气管哮喘恶化等因素后，经过6个月及以上的规范化应用两种或超过两种的支气管哮喘控制药物治疗和管理后仍不能理想控制的哮喘[1]。研究发现支气管哮喘患者糖皮质激素诱导转录因子1 基因位点基因突变可引起机体对糖皮质激素吸入治疗的反应性下降，因此我们拟通过探索分析rs37972、rs37973 的基因多态性和新疆地区难治性哮喘患者间关系，为新疆地区的难治性哮喘患者的个体化及精准治疗提供理论依据。

1 对象与方法

1.1研究对象 对我院住院规范化吸入ICS/LABA 治疗6月及以上的支气管哮喘患者进行随访，从中纳入支气管哮喘完全控制者30 例(ACT 评分 25 分)：女17例，男13例，平均年龄为(51.74±16.89)岁；难治性哮喘者30例(ACT 评分<20 分)，女18例，男12例，平均年龄为(49.23±12.05)岁；同期健康体检者30例，女16例，男14例，平均年龄为(50.12±11.25)岁，均已签署过知情同意书。

1.2研究方法

1.2.1DNA 制备 依照 Greiner 公司提供全血基因组 DNA 试剂盒说明书进行 DNA 制备。

1.2.2基因位点选取 通过盲筛的方法在UCSC 数据中选取GLCCI1 的位于启动区的基因位点rs37972、rs37973。

1.2.3引物设计 应用美国 Sequenom 公司 MassARRAY Assay Design 软件进行引物设计。

1.2.4基因分型检测 应用多重 PCR 技术、MassARRAY的 i-PLEX 单碱基延伸技术，并最终通过基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析质谱技术进行分型检测。

1.3数据分析 采用 SPSS 22.0 数据分析软件系统进行。计量资料应用均数±标准差；组间基因型或等位基因分布频率的比较应用χ2检验，计算相对风险度(OR)和 95%可信区间(CI)；3 种基因型间比较应用方差分析，2 种基因型间比较应用 t 检验。……